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本发明公开了一种基于修饰crRNA的CRISPR‑Cas检测体系。本发明对crRNA的3’和5’末端进行保护性修饰,包括延伸脱氧核糖核酸链,在核苷酸之间使用硫代磷酸酯(PS)键替代磷酸二酯键以及对碱基进行甲基化;发现通过对crRNA进行特定的修饰后,crRNA的稳定性得到了提高,而且在核糖核酸外切酶的条件下,90min后修饰crRNA的功能性依然保存良好,酶活力保留率在80%以上;而且在Cas12体系中修饰后的crRNA反式切割活性比未修饰时提升了4.4倍,提高了检测的灵敏度和结果的准确性;并且
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 116574732 A
(43)申请公布日 2023.08.11
(21)申请号 202310547740.6
(22)申请日 2023.05.15
(71)申请人 中山大学
地址 510275
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