NY_T 2622-2014灰飞虱抗药性监测技术规程.pdf

ICS 65.020B 15NY中华人民共和国农业行业标准NY/T飞虱抗药性监测技术规程Guideline for insecticide resistance monitoring of the small brown planthopper2014-10-17 发布2015-01-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2622—2014前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、南京农业大学、江苏省植物保护站本标准主要起草人：张帅、高聪芬、邵振润、张凯、张绍明、张巍、班兰凤一 NY/T 2622—2014灰飞虱抗药性监测技术规程1范围本标准规定了稻苗浸渍法监测灰飞虱[Luodelphu.rstriutellus（Fallen）抗药性的方法。本标准适用于灰飞虱对杀虫剂的抗药性监测。2试剂与材料2.1生物试材试虫：灰飞虱Laodelpharstriatellus（Fallen）;供试植物：采用感虫水稻品种.如武育梗3号。2.2试验药剂原药。2.3试验试剂TritonX-100(或吐温80）；丙酮（或二甲基甲酰胺）；所用试剂-般为分析纯。3仪器设备3.1电子天平（感量0.1mg）；3.2塑料杯（容量：350ml；上口直径：7cm.下口直径：5cm.高：10cm）；3.3养虫盒（规格：35cm×23cm×13cm）；3.4移液管（2mL）；3.5容量瓶（10ml、25ml);3.6量筒（500ml）；3.7烧杯（500ml);3.8吸虫器；3.9移液器；3. 100人工气候箱：温度（25±1)℃、湿度85%±10%、光照周期16h：8h(I：D)。4试验步骤4.1试材准备4.1.1试虫准备试虫采集选当地具有代表性的农田（如不同作物或品种）3块～5块，每块田随机选取5点用吸虫器等工具采集生长发育较一致的灰飞虱成虫或若虫.每地采集虫量1000头以上，供室内饲养。试虫饲养大田采集的成虫或若虫，在人工气候箱内（25士1）℃、湿度85%士10%、光照周期16h：8h（I：D)无土种植的水稻上饲养，以室内饲养的F，或F代生理状态一致的3龄中期若虫供抗药性监测。4.1.2试验水稻准备将催芽48h的稻种均匀撒于垫有湿滤纸的养虫盒中.置于培养箱中.定时浇水以保持稻苗的正常1 NY/T2622—2014生长.6d后.将稻苗（一叶-心-苗高约6cm）分成30株一组，于阴凉处晾至根部无明水，供测试用4.2药剂配制在电子天平上用容量瓶称取一定量的原药，用有机溶剂（如丙酮等.吡蚜酮用二甲基甲酰胺）溶解，加入终浓度0.1%TritonX-100（或0.1%吐温80）.用有机溶剂定容.加工成制剂。用移液管吸取一定量的制剂加入塑料杯中，用蒸馏水稀释配制成一定质量浓度的药液供预备试验。根据预备试验结果，按照等比梯度设置5个～7个系列质量浓度。每质量浓度药液量不宜少于250ml.。4.3处理方法4.3.1浸药将试验稻苗在配制好的药液中浸渍10s，取出沥至无水滴下，置于垫有滤纸的塑料杯中。按试验设计浓度从低到高的顺序重复上述操作，每浓度处理3次以上重复，以含有与最高浓度药液等剂量的有机溶剂的蒸馏水溶液作空白对照。4.3.2接虫与培养在室温晾30min后，用吸虫器将3龄中期若虫移人上述塑料杯中，每杯20头，杯口用保鲜膜封住并用3号昆虫针扎孔，然后转移至温度为（25土1）℃.相对湿度为85%士10%、光周期16h：8h（1：D）的人工气候箱中饲养和观察。4.4结果检查分别于处理后2d(有机磷类、氨基甲酸酯类及拟除虫菊酯类）、4d(氯化烟酰类和苯基吡唑类）和5d（吡啶甲亚胺杂环类）检查试虫死亡情况，记录总虫数和死虫数。5数据统计与分析5.1计算方法根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式（1）和式（2）计算，计算结果均保留到小数点后两位：P.=×100..(1)IN+式中：Pl———死亡率，单位为百分率（%）；K-表示死亡虫数，单位为头；N——表示处理总虫数，单位为头。P, -PPa=X100..(2)100-P.式中：P2—-—校正死亡率，单位为百分率（%）；P：—处理死亡率，单位为百分率（%）；P.一—一空白对照死亡率，单位为百分率（%）。若对照死亡率<5%.无需校正；对照死亡率在5%～20%之间.应按式（2）进行校正；对照死亡率》20%.试验需重做。5.2统计分析采用SAS、POLO、PROBIT、DPS、SPSS等软件进行统计分析.求出每种药剂的ILC值及其95%置信限、b值及其标准误，6抗性水平的计算与评估6.1敏感毒力基线2 NY/T2622—2014灰飞虱对部分杀虫剂的敏感毒力基线（参见附录A）。6.22抗药性水平的分级标准抗药性水平的分级标准见