牛肉膏蛋白胨培养基的配制与灭菌.pptVIP

1）用之前检查水位及水质。若水质不好，需换水 2）放置灭菌物品，勿过满；瓶子灭菌，瓶盖拧松 3）盖上锅盖，相对的两个螺帽一起拧 4）启动加热，同时打开放气阀；检查安全阀是否关上。调整温度时间121℃ 15min。 5）待排气阀冒出大量热气并持续约2~5min后排尽冷空气后，再将其关闭； 6）灭菌结束，待压力下降至0，可打开放气阀，之后开盖。注意防止烫伤 7）固体物品可进行干燥；液体物品冷却后拧紧。尽量避免二次污染。 当前第26页\共有56页\编于星期四\4点 5.鼓风干燥箱 当前第27页\共有56页\编于星期四\4点 6.超净工作台 当前第28页\共有56页\编于星期四\4点 每次使用前，先用75%酒精（或新洁尔灭）擦洗台面，并提前用紫外线灭菌灯照射15~30min处理净化工作区内积存的微生物；关闭灭菌灯后应启动风机使之运转2min后再进行培养操作；工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流流型不受干扰；使用完毕应及时清理工作台面上的物品并用酒精擦拭台面使之始终保持洁净。 当前第29页\共有56页\编于星期四\4点 7.微量移液器的使用 当前第30页\共有56页\编于星期四\4点 今天的工作： 1.固体物品的灭菌 2.配制培养基并进行灭菌 3.学习倒平板 4.学习斜面培养基制作 5.超净台的准备 6.划线接种 7.灭菌效果检查 当前第31页\共有56页\编于星期四\4点 开始实验 1.固体物品： 1）平皿（6只/组） 2）试管与棉塞/塑料封口（6只/组）的包扎 3）灭菌蓝色、黄色和白色枪头 将以上物品放入灭菌锅中进行灭菌121℃ 20min 当前第32页\共有56页\编于星期四\4点 2.培养基： 培养基分 液体、半固体和固体 3种 液体培养基有各种肉汤培养基，主要用于细菌扩大培养； 半固体培养基含0.4%琼脂，主要用于保存细菌 固体培养基含15%~20%琼脂，主要用于分离细菌 当前第33页\共有56页\编于星期四\4点 牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15-20g pH 7.4-7.6，加水至1 000mL；若需分装，需先融化，摇匀后分 于121℃高压灭菌15~20min备用 用途：普通细菌常用的培养基 （1）固体培养基配置 当前第34页\共有56页\编于星期四\4点 请大家配制： 请大家查看“营养琼脂”的成分与配制说明，每组配置牛肉膏蛋白胨固体培养基150mL于锥形瓶中 请大家先写出1L的配方，然后再写出150mL的配方 当前第35页\共有56页\编于星期四\4点 配制完毕，将配制好的培养基装入锥形瓶内，瓶口塞上棉塞，用牛皮纸/报纸包扎瓶口，标注好组别，进行高温高压蒸汽灭菌 当前第36页\共有56页\编于星期四\4点 （2）液体培养基 为固体培养基中不含琼脂 牛肉膏蛋白胨培养液 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g pH 7.4-7.6，加水至1 000mL 于121℃高压灭菌15~20min备用 用途：普通细菌常用的培养基 当前第37页\共有56页\编于星期四\4点 请大家查询LB培养基配方 每组配置LB液体培养基50mL于锥形瓶中，包扎好瓶口（纱布+牛皮纸/报纸）后灭菌 请大家先写出1L的配方，然后再写出50mL的配方 当前第38页\共有56页\编于星期四\4点 1.固体物品的灭菌 √ 2.配制培养基并进行灭菌 √ 3.学习斜面培养基制作 4.学习倒平板 5.超净台的准备 6.划线接种 7.灭菌效果检查 当前第39页\共有56页\编于星期四\4点 3.如何倒平板 （1）超净工作台的准备 将超净工作台台面用酒精棉球擦干净；关上门后，紫外灯打开，灭菌15-30min 灭菌结束，打开风机 当前第40页\共有56页\编于星期四\4点 LOGO 一、复习 二、实验：配培养基与灭菌 三、斜面的划线培养 四、倒平板的操作 五、平板划线培养 当前第1页\共有56页\编于星期四\4点 一、复习 当前第2页\共有56页\编于星期四\4点 当前第3页\共有56页\编于星期四\4点 《微生物培养与检验》主要课程内容 1.微生物营养需求 2.微生物形态 3.微生物纯化、分离 4.微生物培养、筛选与保存 5.微生物检验 当前第4页\共有56页\编于星期四\4点 课程内容 微生物吃什么？ 1 微生物长的什么样？ 2 如何得到微生物？ 3 如何保存微生物？ 4 我很爱吃熟食（猪头肉）