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生物安全实验室乙型肝炎病毒实验活动风险评估报告 一、生物学特性 （一）种类和病毒分型 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV），在分类上归属于嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属，是乙型肝炎的病原体。电镜下，HBV感染者的血清中可见三种不同形态的病毒颗粒，即大球形颗粒、小球形颗粒和管形颗粒。 1.大球形颗粒 亦称Dane颗粒，是具有感染性的完整的HBV颗粒，直径约42nm，由包膜和核心组成。包膜位于病毒外层，由脂质双层和病毒编码的包膜蛋白组成，包膜蛋白的主要成分是HBsAg，病毒核心内部含病毒的DNA及DNA多聚酶。 2.小球形颗粒 直径约22nm，是一种中空颗粒，是HBV感染后血液中最多见的一种。它由HBsAg，即病毒的包膜组成。在此颗粒中未检出DNA及DNA多聚酶，因此无感染性。 3.管形颗粒 直径约22nm，长度约100～500nm。实际上，它是由小球形颗粒聚合而成，无感染性。 （二）来源 1965年，Blumberg等首次报道了澳大利亚抗原；1967年，Krugman等发现澳大利亚抗原与肝炎有关，故称其为肝炎相关抗原（HAA），随后证实这种抗原是HBV的表面抗原。1970年，Dane在电镜下发现HBV完整颗粒，称之为Dane颗粒。1979年，Galibert测定了HBV全基因组序列。HBV感染是全球性的公共卫生问题。我国是乙型肝炎的高流行区，人群HBV携带率约为8%～9%，携带者超过1.2亿人。 （三）传染源 主要传染源为乙型肝炎患者或无症状HBV携带者。不论在潜伏期、急性期或慢性活动初期，病人血清都有传染性。 （四）传播途径 1.血液和血制品传播 输血或注射是重要的传染途径，此外，外科和口腔手术、针刺、共用剃刀、皮肤黏膜的微小创伤污染含少量病毒的血液，均可能导致感染。 2.垂直传播 多发生于胎儿期和围生期。此外，HBV也可通过哺乳传播。 3.性传播和密切接触传播 由于乙型肝炎患者和HBsAg携带者的精液、阴道分泌物均可检出HBsAg，HBsAg阳性的配偶较其他家庭成员更易感染HBV，表明HBV可以经性途径传播。近来有人报告在急性乙型肝炎患者和慢性HBsAg携带者唾液标本中检测到HBsAg及Dane颗粒，因此，HBsAg随唾液经口传播的途径应当重视。 （五）易感性 未主动或被动免疫过，体内无抗-HBs的人均极为易感。 （六）潜伏期 乙型肝炎的潜伏期为30～160天，处于潜伏期的HBV感染者因症状不明显，不易被觉察，作为传染源的危害性比患者更大。 （七）剂量-效应关系 HBV的传染性很强，据报道，接种0.00004ml含病毒的血液足以使人发生感染。 （八）致病性 HBV的致病机理尚未完全明了。鉴于乙肝临床类型可表现为多种多样（如急性肝炎、慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎、重症肝炎及HBsAg无症状携带者），因而认为HBV的致病作用与一般病毒不同。可能不是由于病毒在靶细胞内增殖而直接损害靶细胞，而是通过机体对病毒的免疫反应而引起病变和症状。 1.特异性抗体 受乙肝病毒感染后，机体可产生三种抗体，抗-HBs、抗-HBc及抗-HBe。抗-HBs一般在感染HBV后4周出现，对乙肝有保护作用。据报道，在712名医务人员中，有抗-HBs者发生乙肝的不到1%，而无抗-HBs者有11%发生肝炎。但抗-HBs仅能作用于细胞外的HBV，在预防感染上较重要，而在疾病恢复时尚需细胞免疫协同作用。抗-HBc的出现反映了HBV新近感染及正在体内进行增殖，因此，它可用为HBV在体内复制的一个指标。抗-HBc一般在感染后60～150天出现，往往在症状出现前或出现不久后即存在，比抗-HBs出现要早31～87天，但不如抗-HBs存在持久。抗-HBc与肝中HBcAg量有关，慢性HBsAg携带者抗-HBc滴度较低，慢肝活动期、肝硬化及肝癌患者则较高。滴度波动与病情呈平行关系，由于抗-HBc在疾病恢复过程中不仅不升高、反而下降，因此，认为抗-HBc与抗-HBs不同，它与保护无关，而与病毒增殖和肝细胞损害有关。抗-HBe能使病毒活力降低，可能有保护作用，但机制不一样。 2.免疫复合物的损伤作用 在乙型肝炎病人血循环中常可测出HBsAg—抗-HBs的免疫复合物。免疫复合物可引起Ⅲ型变态反应，其中以关节炎和肾炎最为常见。在暴发性肝炎病人血中有时也可同时测出HBsAg—抗-HBs，这种病人预后不良，死亡率高。因此，认为免疫复合物可在肝外引起病人的一系列症状。如大量免疫复合物急性沉着于肝内，致毛细血管栓塞，则可能引起急性肝坏死而导致死亡。 3.细胞介导的免疫反应 目前认为HBV是非溶细胞性的，即不会增殖裂解被感染的细胞。因此，机体清除乙肝病毒主要依赖T细胞（Tc，T杀伤细胞）或通过抗体介导的NK细胞来杀伤靶细胞，将病毒释放于体液中，以后再经抗体作用。实验研究