LS_T 6129-2017粮油检验 粮食中玉米赤霉烯酮的测定 超高效液相色谱法.pdf

X 11ICS 67.040LS中华人民共和国粮食行业标准LS/T 6129—2017粮油检验粮食中玉米赤霉烯酮的测定超高效液相色谱法Inspection of grain and oils—Determination of zearalenone in grains-Ultra-high performance liquid chromatography2017-10-27发布2017-12-20实施家粮食局发布 LS/T 6129—2017前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口，本标准起草单位：国家粮食局科学研究院、安微国家粮食质量监测中心、潮南国家粮食质量监测中心、吉林省粮油卫生检验监测站、黑龙江粮油卫生检验监测站、北京农业质量标准与检测技术研究中心。本标准主要起草人：谢刚、李丽、王松雪、黎睿、叶金、胡斌、倪小英、张月、佟春艳、陆安样。 LS/T油检验粮食中玉米赤需烯酮的测定超高效液相色谱法1范围本标准规定了粮食及其制品中玉米券酶烯酮超高效液相色谱法测定的原理、试剂与仪器设备、分析步骤、结果计算等内容。本标准造用于粮食及其制品中玉米赤莓烯酮的测定。本标准方法玉米泰幕烯酮检出限为5μg/kg，定量限为10=g/kg.2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 602化学试剂杂质测定用标准落液的制备GB/T 5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理用提取液提取试样中的玉米赤幕烯酮，免疫案和柱净化、富集后，用超高效减相色谱荧光检测器进行测定，外标法定量，试剂和仪器设备除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中一级用水要求。4.1试剂4.1.1甲醇(CH,OH)：色谱纯4.1.2乙晴(CH,CN)：色谱纯，4.1.3浓盐酸(HC)：分析纯，4.1.4氯化钠((NaCI)：分析纯。4.1.5磷酸氢二钠(Na;HPO,）：分析纯。4.1.6磷酸二氢钾(KH,PO,)：分析纯。4.1.7氯化钾(KCI)：分析纯。4.1.8吐温-20：分析纯，4.1.9乙睛/水(9010)：取90mL乙晴(3.1.2)加10mL水，4.1.10磷酸盐-吐温20缓冲液(PBST缓冲液）：称取8.0g氧化钠（4.1.4)、1.2g磷酸氢二钠（4.1.5)、0.2g磷酸二氢钾（4.1.6)0.2g氟化钾（4.1.7)加人800mL水，加人2mL吐温-20(4.1.8)，用浓盐酸（4.1.3）调节pH为7.0，最后用水定容为1L。1 LS/T 6129—2017其他试剂符合GB/T602的要求。4.2标准品4.2.1玉米赤霉筛酮(Zearalenone)标准品：纯度>98%；或经国家认证并投予标准物质证书的标准物质。4,2,2玉米赤需烤酮标准储备落藏：采用有证标准物质落液作为储备液；或准确称取玉米赤每炼酮标准品（4.2.1)0.1mg(精确至0.01mg），用甲醇落解并定容至10mL，配成浓度为10mg/L的标准储备渡。20℃避光保存。4.2.3玉米本霉烯酮标准工作溶液：根据使用需要，准确吸取一定量的玉米赤霉烯酮储备液（4.2.2），用甲醇定容，分别配成相当于10μg/L、20pg/L50μg/L、100μg/L、200μg/L500μg/L的系列标准工作液。4C避光保存，有效期1周，4.3材料与仪器设备4.3,1玉米赤霏酮免疫宗和柱。4.3.2定性滤纸：p12cmWhatman4号，或性能相当者，4.3.3玻璃纤维滤纸：9cmWhatmanGF/A，或性能相当者。4.3.4滤膜：0.22μm孔径，有机相，4.3.5注射器：20mL，4.3.6离心管：50mL,4.3.7三角版：250mL.4.3.8离心管，4.3.9高速粉碎机。4.3.10高速均质器：转速6500r/min~24000r/min。4.3. 11氮气吹干仪，4.3.12天平：感量0.1g和0.01mg。4.3.13高心机：转速≥5000r/min。4,3.14调速多用振荡器（振荡频率≥150次）。4.3.15空气压力泵。4.3,16试验筛：1mm孔径，4.3.17液相色谱柱；C18柱，（柱长50mm或100mm，柱内径2.1mm，填料粒径1.7μm），或性能相当者。4.3.18超高效液相色谱仪：包括超高效液相色谱仪、超高压液相色谱仪和超高速液相色谱仪，配备荧光检测器和数据处理系统。色谱参考条件：色谱柱：C18柱（4.3.17)。流动相：A：甲醇，B：水；等度洗脱，A: