不同光质对朝鲜淫羊藿生长、生理和黄酮类成分积累的影响.docx

? ? 不同光质对朝鲜淫羊藿生长、生理和黄酮类成分积累的影响 ? ? 代艾林， 张永刚， 艾强， 滕熙超， 杨利民 （吉林农业大学中药材学院，长春 130118） 朝鲜淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai）为小檗科淫羊藿属多年生草本植物，主要分布于中国东北长白山地区、日本海沿岸、朝鲜北部[1]。朝鲜淫羊藿作为常用中药淫羊藿的重要基原，1977年起被历版《中国药典》收载，以其干燥叶入药，具有补肾阳、祛风湿、强筋骨的功效。朝鲜淫羊藿的主要活性成分为黄酮类物质，其中，总黄酮、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C被2020年版《中国药典》列为指标性成分[2]。 吉林省长白山地区是朝鲜淫羊藿的主要分布地。近年来，由于需求量增加和不合理采集，野生朝鲜淫羊藿资源急剧减少，亟需扩大人工栽培以解决朝鲜淫羊藿资源短缺的现状。栽培环境和生态因子是影响朝鲜淫羊藿产量和品质的重要因素。野生朝鲜淫羊藿多生于疏林下、灌丛间或林缘半阴环境，上层林木对太阳辐射的吸收、反射，使得林下透射光的光强和光质发生改变[3]。研究表明，包括光质在内的光环境会影响药用植物的生长和品质[4-6]。因此，光调控成为朝鲜淫羊藿栽培生产中的重要影响因素[7-8]。目前，有关光质对朝鲜淫羊藿生长、生理和黄酮类成分积累的研究还较为缺乏。因此，本文以朝鲜淫羊藿为研究对象，设置4个光质处理，探讨不同光质处理对其生长、生理和黄酮类成分积累的影响，以期为朝鲜淫羊藿培育过程中的光照管理优化、提高药材的产量和品质提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 将由吉林省临江市错草沟的野生朝鲜淫羊藿根茎繁殖而来的朝鲜淫羊藿栽植于吉林农业大学药用植物园，于2020年6月移栽于塑料盆（长、宽、高分别为43.0、18.5、14.0 cm）中培养，选取长势一致的植株作为试验材料。 1.2 试验设计 设置白光（400～690 nm，对照）、红光（600～690 nm）、黄光（560～580 nm）和蓝光（400～510 nm）4种光质处理。将试验材料移至具有不同光源的培养间培养（光照16 h·d-1，日间温度24～27℃，夜间温度15～19℃，空气湿度60%），处理30 d后采收样品，进行相关指标测定。LED光源购自深圳宸华节能照明有限公司。 1.3 测定指标与方法 1.3.1 形态指标测定 采用直尺测量朝鲜淫羊藿株高；游标卡尺测量茎粗；电子天平（德国Sartorius）测量其鲜重；CI-203叶面积仪（美国CID公司）测定叶面积；60℃干燥至恒重后测量干重，粉碎备用。 1.3.2 叶绿素含量测定 采用95%乙醇浸提法[9]测定朝鲜淫羊藿叶片中叶绿素a（chlorophyll a，Chl a）和叶绿素b（chlorophyll b，Chl b）含量，计算叶绿素a+b（chlorophyll a+b，Chl a+b）含量和叶绿素a/b（chlorophyll a/b，Chl a/b）的值。 1.3.3 叶片光合参数测定 使用LCpro+便携式光合作用系统（英国 ADC BioScientific Ltd.）在9:00—10:00测定4个光质处理组的朝鲜淫羊藿叶片光合参数，包括净光合速率（net photosynthetic rate，Pn）、蒸腾速率（transpiration rate，Tr）、气孔导度（stomatal conductance，Gs）和 胞 间 CO2浓 度（intercellular CO2concentration，Ci）。 1.3.4 抗氧化酶活性和渗透调节物质测定 采集4个处理组新鲜朝鲜淫羊藿叶片各0.50 g，3次重复。加适量液氮彻底研磨成粉末，转入10 mL离心管中，加磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）至终体积5 mL，混匀，12 000 r·min-1、4 ℃低温离心20 min，取上清液使用酶标仪进行检测。超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性采取NBT光化还原法于560nm测定；过氧化物酶（peroxidase，POD）活性采取愈创木酚法于420 nm测定；过氧化氢酶（catalase，CAT）活性采取可见光法于405 nm测定；丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量采取硫代巴比妥酸比色法于532 nm测定；可溶性蛋白质含量采取考马斯亮蓝染色法于595 nm测定[9]。 1.3.5 黄酮类成分含量测定 取4个处理组朝鲜淫羊藿烘干样品各0.50 g，3次重复。参照《中国药典》[2]测定总黄酮、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的含量，总黄酮醇苷含量为淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C含量的总和。 1.4 数据处理 采用DPS软件对相关数据进行统计分析，利用