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小 结
第20章 常用分子生物学技术的原理及应用
分子杂交与印迹技术
核酸检测：核酸分子杂交， “探针” 原
理
Southern blot，Northern blot
方
蛋白质检测： Western Blotting 法
三
种
印
迹
技
术
的
比
较
用于 组DNA、重 用于RNA的 用于蛋白质定性定量
组质粒和噬菌体的分析 定性定量分析 及相互作用研究
PCR技术的原理与应用
工作原理
PCR体系基本组成成分
基本反应步骤
主要用途
重要的衍生技术：RT-PCR
原位PCR技术
实时PCR技术
◼ PCR体系基本组成成分
• 模板DNA
• 特异性引物：单链DN 段
• 耐热DNA聚合酶
• dNTPs 变性
95˚C
• Mg2+
◼ PCR 的基本反应步骤
延伸 退火
72˚C Tm-5˚C
◼ PCR扩增终产物的大小
介于两条退火引物5′末端之间的双链DN 段。
实时PCR技术原理
TaqMan探针法
文库
组DNA文库
概念/基本方法/用途
cD
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