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RNA的转录原核课程;端粒的结构 ? 是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体，由多 个串联在一起的短寡核苷酸5-8bp序列组成。 ? 5 /-（TxGy）n；3/-(AxCy)n； ? 其中x，y是碱基数，一般在1-4范围内。n是短 寡核苷酸序列的重复次数，可以多达数千次。 ? 人的端粒DNA约5-15 kb。;端粒的功能 ? 保证线性DNA的完整复制； ? 保护染色体末端不受核酸酶水解和不发 生染色体的异常重组；;体细胞端粒酶活性低。随着复制次数的增加端粒DNA逐步缩短，细胞逐渐停止分裂，而进入凋亡。 恶性肿瘤细胞可表达端粒酶，永生分裂。;端粒DNA的合成 端粒酶(telomerase)是反转录酶由蛋白质和RNA两部分组成的，它以自身的RNA为模板，在随从链模板DNA的3′OH末端延长DNA。 再以这种延长的DNA为模板，继续合成随从链形成端粒结构。　;第6页/共127页;第7页/共127页;第8页/共127页;第9页/共127页;第10页/共127页;第11页/共127页;???六章 　 RNA的转录;引言;第14页/共127页;第15页/共127页;第16页/共127页;第17页/共127页;第18页/共127页;第19页/共127页;第20页/共127页;第21页/共127页;第22页/共127页;第23页/共127页;第24页/共127页;第25页/共127页;第26页/共127页;第27页/共127页;第28页/共127页;第29页/共127页;Ribosome tructure;第31页/共127页;Signals for translation initiation ;Translation;第34页/共127页;第35页/共127页;第36页/共127页;第37页/共127页;第38页/共127页;第39页/共127页;第40页/共127页;第41页/共127页;第42页/共127页;第43页/共127页;第44页/共127页;第45页/共127页;第46页/共127页;第47页/共127页;转录是生物界RNA合成的主要方式，是遗传信息由DNA向RNA传递过程，也是基因表达的开始。转录也是一种酶促的核苷酸聚合过程，所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP）。转录产生初级转录物为RNA前体（RNA precursor），它们必须经过加工过程变为成熟的RNA，才能表现其生物活性。 ;转录（transcription） ：以DNA为模板合成与模板DNA链序列互补的RNA单链的过程。 主要步骤：识别、起始、延伸、终止 模板识别：RNA聚合酶与启动子DNA作用并与之结合。在DNA形成转录泡。 通过启动子：转录起始后直到9个核苷酸短链 转录延长： RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动并产生新RNA链伸长。 终止：不再形成磷酸二酯键，RNA－DNA分离，转录泡瓦解，DNA恢复双链。 ;DNA分子双链的划分：　　 编码链：不作复制模板的DNA单链，又称有义链或+链 模板链：作复制模板的DNA单链，又称反义链或-链 ;6.1.1 信使的发现;同年Goldstein和Plaut用同位素标记变形虫RNA前体—— 发现标记的RNA在核内。 标记追踪实验：用短脉冲标记RNA前体，然后将细胞核转移到未标记的变形虫中，经过一段时间又发现被标记的RNA已在细胞质中。 这表明什么？;1956年E. Volkin和 L.Astrachan： 用同位素脉冲——追踪标记 表明T2噬菌体新合成的RNA的碱基比和自身的DNA碱基比相似，而和细菌的碱基比不同。T2感染细菌时注入的是DNA，而在细胞里合成的是RNA。 这表明什么？;最令人信服的证据是Hall.B.D和Spiegeman,S的DNA-RNA的杂交实验： 将T2噬菌体感染E.coli后产生的RNA分离出来，分别与T2和E.coli的DNA进行分子杂交。 结果这种RNA只能和T2的DNA形成“杂种”链，而不能和E.coli的DNA进行杂交。;法国科学家雅可布（F.Jacob）和莫诺（J. Monod）（1961）进行了一系列的的实验： 将E. coli培养在15N/13C的培养基中，因此合成的RNA和蛋白都被“重”同位素所标记。也就是说凡是“重”的核糖体，RNA和蛋白都是细菌的。 然后用T2感染E. coli，细菌的RNA停止合成，而开始合成T2的RNA。 此时用普通的“轻”培养基（14N/12C），但分别以32P来标记新合成的T2 RNA，以35S标记新合成的T2蛋白，因此任何重新合成的核糖体，RNA，及蛋白都是“轻”的但都带有放射性同位素。;经培养一段时间后破碎细胞，加入过量的轻的核糖体作对照，进行密度梯度离心。 结果“轻”的核糖体上不具有放射性，“重”的核糖体上具有32P和3