DB64_T 1069-2015  同心圆枣组培苗试管外微嫁接育苗技术规程.docx

ICS DB64 宁 夏 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB 64/T 1069—2015 同心圆枣组培苗试管外微嫁接育苗技术规 程 2 0 1 5 - 0 7 - 1 3 发 布 2015-07-13实施 宁夏回族自治区质量技术监督局 发 布 I DB64/T 1069—2015 前 言 本标准的编写格式符合GB/T 1.1-2009 《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》的要求。 本标准由宁夏回族自治区林业厅提出并归口。 本标准由宁夏职业技术学院起草。 本标准主要起草人：张存智、王敏、魏鹏、胡瑞华、尚雁鸿、杨玲、顾文、刘松涛、张娟、侯建春、 詹红、陈青 1 DB64/T 1069--2015 同心圆枣组培苗试管外微嫁接育苗技术规程 1 范围 本标准规定了同心圆枣组培苗试管外微嫁接技术的术语和定义，接穗组织培养、组培苗试管外嫁接、 炼苗、移栽技术。 本标准适用于同心圆枣组培苗试管外微嫁接繁育技术。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 8321.9-2009 农药合理使用准则(九) 3 术语与定义 下列术语与定义适用于本标准。 3.1 组织培养 在无菌培养基上，对植物离体器官、组织或细胞进行培养，以形成再生植株，或培养新的育种材料 的生物技术。 3.2 外植体 生长在培养基上的被培养的器官、组织或细胞。 3.3 培养基 为外植体的生长、发育提供所需物质的基质。 3.4 接种 将外植体经消毒后，在无菌条件下植入培养基上的过程。 3.5 同心圆枣组培苗微嫁接技术 2 DB64/T 1069—2015 同心圆枣组培苗微嫁接技术以该品种试管苗长1.2cm～1.5cm 的两芽茎段为接穗，以预先培养出 的酸枣苗为砧木，在自然条件下进行嫁接，之后继续培养。 4 接穗的组织培养 4.1 培养基配置 同心圆枣外植体启动培养基为MS大量(硝酸铵为550mg.L-1)+ MS微量+ MS有机+6-BA 1.5 mg.L -1+IBA0.3mg.L-1, 蔗糖20 g.L-1 和琼脂4.0 g.L-1, pH值5.8～6.0。继代增殖培养基可选用： MS 大量(硝酸铵为550mg.L-1)+MS 微量+ MS有机+IBA0.1mg.L-1+NAA0.05mg.L-1+ 蔗糖20g.L-1+ 琼脂 粉4.0g.L-1。 4.2 外植体接种 4.2.1 外植体的选择 选择生长健壮、无病虫害的生长3年～5年同心圆枣植株作为采样母株，取幼嫩枣头为外植体，采样 最佳时间为5月～6月。 4.2.2 外植体消毒 将外植体剪成3.5cm～4.5cm的茎段，先在滴加适量洗洁精的清水中刷洗干净，然后在自来水龙头下 流水冲洗2h～4h, 经过修剪处理，然后置于超净工作台上，75%乙醇处理20s～30s, 用无菌水洗3次～5 次；0.1%氯化汞处理10 min～15min, 同时滴加2滴浓度为10%吐温-80,用无菌水洗3次～5次即可。 4.2.3 接种 在超净工作台上，将消毒后的外植体切割成2芽茎段竖插于培养基中。 4.3 组培苗培养 4.3.1 启动培养 外植体接种后5d～7d 开始转绿，20d 左右发芽长出新芽。 4.3.2 增殖培养 当启动培养抽出的新芽长至2.0cm～3.0cm时，切下转入增殖培养基上进行继代增殖培养。对继代材 料，待长至瓶高4cm～5cm时，切成含顶芽茎段和含2个芽茎段进行增殖培养，用同种培养基转接，30d~ 40d继代1次。 4.3.3 培养条件 温度25℃~30℃,光照强度2000 Lx～3000Lx,每天光照16h。 5 组培苗试管外嫁接 5.1 接穗的处理 5.1.1 组培苗炼苗 3 DB64/T 1069—2015 将生长健壮，培养30d～40d,5cm～7cm 高的同心圆枣组培苗进行室内开瓶强光炼苗，光强在 10000Lx～20000Lx 的地方，开瓶，倒入瓶高0.5cm～1cm的无菌水，瓶口开度为1/4～1/3,炼苗时间为5d~ 10d。 练苗室内的温度应20℃~30℃,空气湿度在30%～40%。 5.1.2 采集接穗 炼苗结束后，将组培苗剪成带两芽茎段作为接穗，接穗下部削成楔形。 5.2 砧木准备 5.2.1 酸枣的催芽处理 2月初，将适量种子放入清水中浸泡0.5h, 然后将上浮的杂质和秕粒种子捞出；再用0.3%～0.5%的 高锰酸钾溶液浸种1h; 然后，将消毒好的种子在60℃的热水中浸泡，并不断搅拌，待