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苹果枝干轮纹病抗性的相关性及遗传规律研究作者:李小静 张瑞萍 阎振立 陈迪新 张恒涛 刘珍珍 过国南来源:《江苏农业科学》2016年第09期
摘要:使用树干分段级数加权的方法进行田间自然病情调查,并结合田间接种和离体枝条接种的方法对秦冠×富士杂交F1代进行抗病性鉴定,分析了各抗性指标的次数分布和正态分布,以及各抗性指标间的相关性,研究了苹果杂交F1代枝干轮纹病抗性的遗传规律。结果表明,皮孔密度和大小与轮纹病抗性各指标间没有显著相关性;田间自然感病的级数加权感病高度和加权感病级数与田间接种的感病指数均呈显著正相关;苹果杂交F1代枝干轮纹病感病指数和离体侵染率均表现广泛分离,呈偏正态分布。可见:皮孔密度和大小不宜作为枝干轮纹病抗性的直接鉴定指标;田间接种较离体接种更适合与田间自然病情调查相结合对枝干轮纹病抗性进行评价;苹果枝干轮纹病抗性是数量性状,可进一步对其进行QTL定位等研究,以期更早实现分子抗病性育种。
关键词:苹果杂交F1代;枝干轮纹病;抗性;遗传规律
中图分类号: S661.1 文献标志码: A
文章编号:1002-1302(2016)09-0171-04
苹果枝干轮纹病是由轮纹病菌[Botryosphaeria dothidea(Moug.) Ces. et de Not.]在苹果枝干上侵染而引起的一种病害[1],是目前我国苹果生产上三大病害之一,病害严重时可削弱树势,造成死枝死树。虽然传统防治方法如药剂防治能达到一定的防治效果,但是有些药剂会产生环境污染等问题,应用抗病品种能明显减少病害的发生,可以减少药剂防治可能产生的环境污染等问题的出现,因此开发和利用苹果本身的抗病基因,进行抗病育种和遗传改良,是解决病害的有效途径。
鉴定和评价苹果种质资源对轮纹病的抗病性是选育和利用抗病品种防治轮纹病的基础,苹果抗病性不仅与品种的遗传性有关,与环境条件也有关,即便是同一品种,在不同地点环境下抗病性鉴定结果也可能不一致[2-3]。所以,采用简便、准确、实用、可靠的评价方法对苹果种质资源进行抗病性评价十分必要。目前苹果抗病性的研究方法主要有田间自然病情调查和人工接种鉴定,此外还可通过抗病与感病品种枝条的性状差异进行鉴定。有研究表明,皮孔是病菌入侵的主要途径,通过调查富士苹果枝干轮纹病不同部位的轮纹病发生频率,发现皮孔部位发病频率为92%,因此认为皮孔密度与轮纹病发生程度关系密切[4-5]。李广旭等认为皮孔密度与枝干轮纹病病情指数存在明显正相关[5],阎振立等认为皮孔密度、皮孔密度和皮孔直径之积均与苹果枝干轮纹病的自然发病程度存在显著正相关,可以此来判断品种对枝干轮纹病的抗病程度[6],但韩园园等以红玉×金冠杂种后代为试材发现枝条皮孔密度与枝干接种轮纹病后的病情指数间均未见显著相关性[7]。
迄今为止,国内有关苹果种质资源对轮纹病抗病性的研究报道较多,不同苹果种质资源对苹果轮纹病的抗病性存在明显差异,生产上的富士、金冠、华冠等主栽品种均为感病品种,而秦冠、北之幸、鸡冠对枝干轮纹病具有较强的抗性[6,8-9]。除了了解品种的抗性外,掌握果树性状的遗传规律对于育种工作者来说也很重要,它是进行果树杂交育种的前提和基础。搞清楚性状的遗传特点对于进行基因连锁分析、基因定位和基因图谱的绘制以及有目的地进行基因分离和克隆也是有必要的,但是由于果树基因高度杂合,对其进行病害的遗传研究有一定难度,目前关于轮纹病抗性遗传研究报道相对较少。为了初步分析苹果枝干轮纹病抗性的遗传规律,比较苹果枝干轮纹病抗性的多种评价方式,了解各抗性指标间的相关性,本研究以抗病品种秦冠为母本、感病品种富士为父本的杂交F1代为试材,使用树干分段级数加权的方法进行田间自然病情调查,并结合田间接种和离体枝条接种的方法对苹果杂交F1代轮纹病抗性进行研究,以期获得更简单、有效、准确的苹果轮纹病评價方法,为苹果枝干轮纹病抗性育种提供研究基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试材料为中国农业科学院郑州果树研究所苹果育种课题组以秦冠×富士杂交培育的202个实生后代F1代为试材。供试材料于2003年杂交,2004年春播种,立地条件及管理水平相同。
1.2 试验方法
1.2.1 病原菌制备 苹果枝干轮纹病病原菌是由中国农业科学院郑州果树研究所病害研究课题组提供的ZZ26菌株,该菌株从郑州市十里铺果园枝干典型病瘤分离获得[6],通过苹果轮纹病菌的遗传多样性分析,被认为是优势类群[10]。
菌株保存在4 ℃的PDA培养基(葡萄糖20 g、琼脂20 g、马铃薯200 g、蒸馏水1 000 mL)中,接种前1周在25 ℃条件下活化、扩繁,选取长势均匀一致的轮纹病菌用于接种。
1.2.2 田间自然病情调查 田间自然病情调查于2014年5月份进行,采用观察法
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