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分子克隆步骤:
一、贴壁细胞总RNA提取:
1、吸掉培养液,用PB 洗一遍?
2、往培养皿中加入1ml,TRIzol,吹打几次(每10cm2 面积,即3.5cm 直径的培养板加1ml)
3、移至1.5mlEP 管,静置5 分钟
4 、加入200ul 三氯甲烷,震荡混匀,室温静置5 分钟
5、4 度12000r/min,离心15 分钟,取上清,约600ul
6、加入500ul 异丙醇,混匀后,静置30 分钟?
7 、4 度12000r/min,离心15 分钟,弃上清
8、加入1ml70%预冷酒精洗涤
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