临床微生物学检验技术 (5).pdf

细菌耐药机制及检测 一、细菌的耐药性 及 产生机制 总论 二、细菌耐药性的检测 细菌耐药性及 产生机制 何为细菌耐药性？ 1 耐药性亦称抗药性，是指细菌对某抗菌药物（抗生素或 消毒剂）的相对抵抗性。 细菌耐药性类型？ （1）固有耐药 （intrinsic resistance）：指细菌对某些抗菌 2 药物的天然不敏感。源于自身染色体上的耐药基因，具有典型 的种属特异性。 （2）获得性耐药 （acquired resistance）：指细菌DNA的改 变导致其获得了耐药性表型，来源于基因突变或获得新基因。 细菌耐药的生化机制 钝化酶的产生 抗菌药物的渗透障碍 （1）β-内酰胺酶：特异性地打开药物分子 细胞壁障碍和（或）外膜通透性的改变。 结构中的β-内酰胺环，使其完全失去抗菌活 性。当前主要由两种β-内酰胺酶介导：超广 谱β-内酰胺酶和AmpC β内酰胺酶。 生物被膜作用 （2）氨基糖苷类钝化酶：分别通过羟基磷 酸化、氨基乙酰化或羧基腺苷酰化作用，使 细菌生物被膜（bacterial biofilm BF）:是细 药物的分子结构发生改变，失去抗菌作用。 菌为适应环境而形成的，可保护细菌逃逸抗 菌药物的杀伤作用 （3）氯霉素乙酰转移酶：使氯霉素乙酰化 使之失去抗菌活性。 （1）抗生素难以清除BF中众多微菌落膜状物 （2）BF具有多糖分子屏障和电荷屏障，阻止 或延缓药物的渗透 （3）BF内细菌多处于低代谢水平状态，对抗 菌药物前敏感 药物作用靶位的改变 BF内部场存在一些较高浓度水解酶，使进入 的抗生素失活。 改变抗生素作用靶位的蛋白质结构和 数量，导致其与抗生素结合的有效部 位发生改变，影响药物的结合。这种 主动排外机制 改变使抗生素失去作用靶点和（或） 亲和力降低。 数十种细菌的外膜上有特殊的药物主动外排系统 细菌耐药性的检测方法 1.耐药性表型检测 2.耐药基因检验 （1）β-内酰胺酶检测 PCR、 （2）超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检 PCR-RFLP、 测、AmpC酶检测、碳青霉烯酶检测 PCR-SSCP、 （3）MRS检测