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0541电泳法
第五法 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法是一种变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法。
本法分离蛋白质的原理是根据大多数蛋白质都能与阴离子表面活性剂十
二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物，使蛋白质分子所带的负电
荷远远超过天然蛋白质分子的净电荷，消除了不同蛋白质分子的电荷效
应，使蛋白质按分子大小分离。
本法用于蛋白质的定性鉴别、纯度和杂质控制以及定量测定。
1.仪器装置
恒压或恒流电源、垂直板电泳槽和制胶模具。
2.试剂
(1)水 (去离子水，电阻率不低于18.2MΩ•cm)。
(2)分离胶缓冲液（4×，A液）：1.5mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲
液 称取三羟甲基氨基甲烷18.15g，加适量水溶解，用盐酸调pH值至8.8,
加水稀释至100ml。
’
(3) 30%丙烯酰胺溶液（B液）：称取丙烯酰胺58.0g、N,N -亚甲基双丙
烯酰胺2.0g，加温水溶解并稀释至200ml，滤纸过滤(避光保存)。
(4)10%SDS溶液（C液）：称取十二烷基硫酸钠10g，加水溶解并稀释至
100ml。
(5)四甲基乙二胺溶液（TEMED，D液）：商品化试剂，通常浓度为10%的
’ ’
N,N,N ,N -四甲基乙二胺。
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