离体蛙心灌流实验.doc

实验五离体蛙心灌流实验 一实验目的 1、 了解蟾蛉离体心脏的灌流的方法。 2、 观察细胞外液钾离于、钙离于浓度变化对心脏活动的影响。 二实验原理 心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍 能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。离体心脏所需的条件应与动 物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动 的变化。 1、任氏 0.65%NaCIi?t 流 细胞易液6冲 液：正常对照 含有 心肌细胞动作电h期间Ca2+内流" NaCl、CaC12、KC1、 J 心肌细胞胞浆6"浓度W J 心肌收缩力卄 NaH2P（）4、Na2HPO4 和蒸 憎水，其电解质、晶体 渗透压、 pH值与蛙的组织液相 近。 2、0.65%NaCl 灌流: 2%CaC12 灌 流 4. 1%KC1 肾上腺索(E) 心肌细胞膜4受体结合 灌流 C芒与肌钙蛋自亲细胞膜对ca嚨透性*肌裟图对A 和力* ■[■、、 肌浆网摄Ca筑速度4 动作电位期从 间C 动作电位期从 间C汐内流 复极期肌浆u￡ 浓度降低建度 5、1:10000 E心肌 5、1:10000 E 心肌舒张卒 心肌收缩力侶 灌流 乙蹴胆腻(Ach) 心肌细胞犠M受体结合 抑制扮通道 细胞膜对K亠谨丧性彳对6加通透性& 1 ?X / 窦房结细腿虽九复扱电位绝动作电位期间内流打 对值増大。4期K十外流増加 4 心肌收缩力只自律性＞ 心肌收缩力只 自律性＞ 1:10000 Ach 灌流 细胞外液6卞浓度显著升高 膜内?外6丛浓度禅度增尢 慢反应细他4期《白动去极速度丨 慢反应细他4期《白动去极速度丨 自律性彳 心率寰 工作細胞动作电位期间Uf内流44 肌浆cF振虔" 肌钙从 墨白结合数贰 ▼ 心肌收端力M 肌浆浓皮 持续升高 6??与肌钙墨白 只结合不解离 ▼ 心肌持续收缩 细胞外液K'诜度轻度升高 细胞外筱K?浓度显著升高 K；抑制C/内流 膜内?外K浓度梯度咸小 1 膜内?外丈浓度梯度减小 i C*内沆减少 + 静息电位绝对值减小 静息电位绝对值减小S-55mV c代的兴奋-收缩 ▼ 静息电位与闽电位 Na通道失活 耦联作用漩小 T 水平的电位差義小 7A V 心肌细胞兴奋性丧失 心肌枚靖力降低 心肌细.胞兴奋性升髙 心脏停搏于舒张状态 7.心得安 0 1 受体阻断剂，抑制肾上腺素与 卩1受体结合，使E不能发挥作用。 &、阿托品 M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。 三实验器材 微机生物信号处理系统，physiology系统，学校服务器系统，蟾蛉离体蛙心, 任氏液,1%KC1, 3%CaCh, 65%NaCl, 1/10000 E,心得安+1/10000,1/100（X） Ach, 阿托品+1/10000 Acho 四实验步骤 1、 标本制备（观看视频） 2、 仪器及标本的连接 3、 具体软件操作： 1） 离于试剂：任氏液-（）.65%NaCl溶液-任氏液清洗-1%KC1溶液一任 氏液清洗-2%CaCb溶液一任氏液清洗 2） 药物试剂：肾上腺素（E）-任氏液清洗-心得安一任氏液清洗-Ach} 任氏液清洗一阿托品一任氏液清洗。 五 实 验 结 果 心虫 ：36次亦 CI --. —■ —4 *—U U— —— - ■ ■ ■ ?? C-1C12 图1离体蛙心灌流 表1离体蛀心灌流数据记录 实验项目 收缩强度 心率 处理前 处理后 处理前 处理后 任氏液 2.45 245 34 0.65% NaCl 2.45 1,65 34 34 2% CaCl2 1.27 3.43 34 38 1%KCL 2.43 243 35 21 1:10000E 0.9 3.46 33 35 E+心得安 1.13 2.49 33 34 l:100(X)Ach 1.05 1.11 33 0 Ach+阿托品 1.13 2.46 34 34 六结果分析 此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦还 能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。体内细胞所直 接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要 条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。 如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！