薄层色谱法的应用 .docxVIP

PAGE PAGE 1 薄层色谱法的应用 薄层色谱法是一种离线色谱技术，操作步骤相对自立，具有比较好的灵便性。薄层色谱可以同时分别、分析多个样品，往往与对比品在同样条件下举行，直观可比性较强口绽开后，可用多种办法检视，得到多方面的信息。主要用于药物的鉴别和杂质检查。 一、鉴别可采纳与同浓度的对比品溶液，在同一块薄层板上点样、绽开与检视，供试品溶液所呈主斑点的色彩(或荧光)和位置(Rf)应与对比品溶液的主斑点全都，而且主斑点的大小与色彩的深浅也应大致相同。或采纳供试品溶液与对比品溶液等体积混合，应显示单一、紧密的斑点。或选用与供试品化学结构相像的药物对比品与供试液的主斑点比较，两者的Rf值应不同；或将上述两种溶液等体积混合，应显示两个清楚分别的斑点。二、杂质检查可采纳杂质对比品法、供试品溶液的自身稀释对比法、杂质对比品法与供试品溶液的自身稀释对比法并用等办法。供试品溶液除主斑点外的其他斑点应与相应的对比品溶液或系列浓度的对比品溶液的主斑点比较，或与供试品溶液的自身稀释对比溶液或系列自身稀释对比溶液的主斑点比较。通常应规定杂质的斑点数和单一杂质量，当采纳系列自身稀释对比溶液时，也可规定估量的杂质总量。三、测定时的注重事项1.薄层板的活化与保存：自制薄层板和商品薄层板在用法前均应举行活化，活化后的薄层板应立刻置于有干燥剂的干燥器中保存。保存时光不宜过长，最好随用随制，放入干燥箱中保存仅作为用法前的一种过渡。2．供试品溶液的制备：溶剂挑选应适当，不能影响点样原点及分别后斑点的外形，普通应挑选极性小的溶剂；惟独在供试品的极性较大、薄层板的活性较大时，才挑选极性大的溶剂。除特别状况外，试液的浓度要相宜，最好控制在使点样量不超过10ul(高效薄层板的点样量不超过5ul)。3．点样：薄层板上供试品溶剂的负荷量极为有限，一般薄层板的点样量最好在10ul以下，高效薄层板在5ul以下。点样量过多可造成原点“超载”，绽开剂产生绕行现象，使斑点拖尾。点样速度要快，在空气中点样以不超过10分钟为宜，以削减薄层板和大气的平衡时光。点样时必需注重勿损坏薄层板表面。待溶剂挥散后方可绽开。4．点样环境：试验环境的相对湿度和温度对薄层分别效果有着较大的影响(试验室普通要求相对湿度在65％以下为宜)，因此应保持试验环境的相对稳定。对温、湿度敏感的品种必需按品种项下的规定，严格控制试验环境的温、湿度。