兽药繁殖毒性试验指导原则.pdfVIP

兽药繁殖毒性试验指导原则 一、概述 （一）定义与目的 繁殖毒性试验是研究药物对动物整个生殖过程影响的评价方法，如对性周 期、性腺功能、交配、受孕、胚胎发育等的影响。受试药物能引起生殖机能障碍， 干扰配子的形成或使生殖细胞受损，其结果除可影响受精卵或孕卵的着床而导致 不孕外，尚可影响胚胎的发生及胎儿的发育，如胚胎死亡导致自然流产、胎儿发 育迟缓以及胎儿畸形。如果对母体造成不良影响会出现妊娠、分娩和乳汁分泌的 异常，亦可出现胎儿出生后发育异常。 为了确保大鼠繁殖毒性试验结果的真实性、可靠性和可追溯性，根据新兽药 研究的规律，结合国内兽药毒理学评价的实际情况制定了本指导原则。 （二）适用范围 本指导原则适用于兽用化学药品、中兽药、消毒剂及饲料药物添加剂大鼠繁 殖毒性作用的测定。 二、试验方法 （一）材料与方法 1.实验动物 选用 5～9 周龄大鼠，试验开始时动物个体间体重差异不超过平均体重的 20% 。购买后至少适应性饲养3 天。每组应有足够的雌鼠和雄鼠配对，产生约20 只受孕雌鼠。为此，一般在试验开始时两种性别每组各需要30 只（F0 ）；在继续 的试验中用来交配的动物每种性别每组需要25 只（至少每窝雌雄各取 1 只，最 多每窝雌雄各取2 只）。选用的亲代雌鼠应为非经产、非孕鼠。 2.剂量及分组 至少设3 个剂量的受试药物组和一个对照组，即高剂量组、中剂量组、低剂 量组和空白对照组。高剂量设计可选最大耐受剂量或有胚胎毒性的剂量，但一般 不应超过饲料的5% 。低剂量对亲代动物应不产生全身毒性或繁殖毒性（可按最 大未观察到有害作用剂量的1/30 或可能摄入量的100 倍）。对照组的饲养和处 理方式与受试药物组相同，根据情况，对照组可以是未处理对照、假处理对照， 如果给予受试药物时使用某种介质，则应设介质对照。如果受试药物通过加入饲 料的方式给予并引起食物摄入量和利用率的降低，需要考虑使用配对饲养的对照 组。 （二）试验步骤 1.受试药物配制 一般用蒸留水作溶剂，如受试药物不溶于水，可用食用油、医用淀粉、羧甲 基纤维素等配成乳浊液或悬浊液。受试药物应于灌胃前新鲜配制，除非有资料表 明以溶液（或乳浊液、悬浊液）保存具有稳定性。同时应考虑使用的介质可能对 受试药物的吸收、分布、代谢或潴留的影响；对理化性质的影响及由此引起的毒 性特征的影响；对摄食量或饮水量或动物营养状况的影响。 2.给药方法 （1）经口给药，可加入饲料、饮水中或灌胃。如果受试药物是灌胃给予， 应每周称体重两次，根据体重计算给予受试药物的量。 （2 ）亲代和子代接受的受试药物剂量（按动物体重给予，mg/kg体重或g/kg 体重）、饲料和饮水相同。F 代的雌鼠和雄鼠在断乳后每日给予。两种性别的大 1 鼠（亲代和F1代）在交配前应每日给予受试药物至少连续10周，并继续给予受试 药物至试验结束。 （3 ）试验期间，所有动物应采用相同的方式给予受试药物；连续给药，每 周7天。 3.交配 每次交配时，每只雌鼠应与从同一剂量组随机选择的单个雄鼠同笼（1 ：1 交配），直到检测到阴栓，或者经过3个发情期或两周。查到阴栓后应尽快将雌、 雄鼠分开，如果经过3个发情期或两周还未进行交配，也应将雌雄鼠分开，不再 继续同笼。配对同笼的雌雄鼠应作标记。所有雌鼠在交配期应每天检查精子或阴 栓，直到证明已交配为止。查到阴栓的当天为受孕0天。预计已怀孕的雌鼠应分 开放入繁殖笼中，孕鼠临产时应提供筑巢的垫料。 4.每窝仔鼠数量的标准化 将每窝仔鼠于出生后第4天调整至相同的数量（一般每窝8-10只，不应少于8 只），尽量做到每窝内雌、雄鼠数量相等，也可以窝内雌、雄鼠数量不等，但各 窝之间两性别的鼠数应分别相同。原窝中多余的鼠应随机抽出，而不应按体重选 择。 5.观察代数 观察代数随受检目的而异，可作一代、二代、三代或多代观察。如果在两代 繁殖试验中观察到受试药物对子代有明显的生殖、形态或毒性作用，则需要进行 第三代繁殖试验，确定受试药物的蓄积作用。 6.一代、二代、三代繁殖试验法