《药物分析》第九章维生素类药物的分析.ppt

生物效价 右旋体 ： 消旋体 = 14 ：10 （天然品） （合成品） dl－α－生育酚醋酸酯 性质 一、 苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链 1、易溶于有机溶剂，不溶于水 2、UV 3、酯键 易水解 4、氧化性 VitE H+ or OH- △无氧或其它氧化剂存在 游离生育酚 有氧或其它氧化剂 醌型化合物 75℃15′ （一） 硝酸反应 橙红色 鉴别 二、 （橙红色） 生育红 生育酚 HNO3 强氧化剂 取本品约30mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热15分钟，溶液应显橙红色。 ChP2010鉴别方法： 三氯化铁－联吡啶反应 △ [O] （二） 生育酚 对-生育醌 [O] 弱氧化剂 血红色 = 41.0～45.5 λmax = 284nm λmin = 254nm 0.01%无水乙醇中 UV法 （三） 维生素EUV图 薄层板 硅胶G 展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1） 显色剂 硫酸（105℃ 5′） VitE Rf = 0.7 TLC法 （四） 游离生育酚 硫酸铈滴定液（0.01mol/L） 二苯胺（亮黄→灰紫） 利用游离生育酚的还原性， 将硫酸铈还原成硫酸亚铈 检查 三、 原理 （一） 试剂 （二） （B生育酚= 430.8） 例 取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过 1.0ml。 限量 （三） 四、 含量测定 GC法 （一） GC特点 1、 选择性好 灵敏度高 速度快 分离效能好 挥发性低、不稳定、极性强→衍生化, 易受样品蒸气压限制 载气→N2 固定液→硅酮（OV-17） 担体→硅藻土或高分子多孔小球 柱温→265℃ 检测器→氢火焰离子化检测器(FID) 内标→正三十二烷 n ≥ 500 R≥2 VitE测定的色谱条件 2、 内标法加校正因子 内标法 供试液（样品+内标） 内标物 对照液（对照+内标） 是样品中不存在的物质 与被测组分峰靠近 能与各组分完全分离 与被测组分的量接近 利用生育酚的易氧化性 还原型 氧化型 二苯胺（亮黄→灰紫） △ 原理 1、 铈量法 （二） 指示剂 2、 含量计算 4、 MVitE = 472 样品→ dl－α－生育酚 固定相→十八烷基硅烷键合硅胶 流动相→甲醇-水（49 ：1） 检测波长→292nm R＞2.6 RSD≤0.8% JP - RP - HPLC法（外标法） （三） * 靛(dian) * 靛dian * 偏磷酸 与碱反应 （六） 水解反应 （七） UV特征 与氧化剂的反应 （一） 鉴别试验 二、 1、与AgNO3反应 2、与2，6 - 二氯靛酚反应 (ChP2010) 还原型 氧化型 玫瑰红色 蓝色 OHˉ (ChP2010) 酚亚胺（无色） （玫瑰色） （无色） 3、与碱性酒石酸铜反应 USP 4、与KMnO4反应 糖类的反应 （二） 或盐酸 50℃ 吡咯 USP （蓝色） (糠醛) （戊糖） 50℃ (吡咯) UV （三） BP 0.01mol/L HCl 指示剂 淀粉指示液 原理 1、 碘量法 （一） 含量测定 三、 H+ 取本品约0.2g，精密称定，加新 沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶 解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴 定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝 色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液 (0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6 方法 2、 （1）酸性环境 稀 HAC （2）新沸冷H2O 减慢VitC被O2氧化速度 讨论 4、 （3）立即滴定 赶走水中O2 减少O2的干扰 2，6 - 二氯靛酚钠滴定法 （二） USP JP 原理 1、 自身指示终点法 方法 2、 （2）快速滴定 2min内 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC 防止其他还原性物质干扰 讨论 3、 （3）缺点 需经常标定 贮存≤一周 不稳定 干扰多 氧化力较强 HPLC法 （三） 1、HPLC的优点 灵敏度高 选择性高 分离分析同步 微量分析 干扰少 快速 2、HPLC法分离VitC常用方法及测 定对象 对象 制剂、生物样品、果汁