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;;一、微生物分离和培养的基本理论;;1.纯培养物培养
在实验室中利用 培养基可以筛选和分离某种微生物,然后在_________
的条件下,在 培养基上培养该微生物形成单个菌落,即由一个微生物(如某种细菌)形成的单个菌落。 即为纯培养物,可用于科学研究。
2.分离特定的微生物
(1)平板分离法
①概念:能将 微生物分离和固定在固体培养基表面或里面,每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成 。
②分离、培养微生物最常用的培养基是 培养基。;③类型:平板分离法有多种,如 平板法、 平板法等。
a.涂布平板法分离细菌:将待分离的样品进行10倍系列 ,取一定稀释度的样品0.1 mL倒入预先制备好的培养基平板中,用无菌__________
将样品 均匀,恒温培养一段时间,以获得单个菌落的方法。
b.混合平板法分离细菌:将待分离的样品进行10倍系列稀释,取一定稀释度的样品0.1 mL与 的培养基 ,将混合液倒入无菌培养皿中制成平板,培养一段时间,以获得单个菌落的方法。;(2)选择培养分离
①概念:科学家针对某种微生物的 ,设计一个特定的环境,使之
这种微生物的生长,而 其他微生物的生长。这种通过
进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。
②依据原理:不同的微生物有不同的 或对 有不同的敏感性。;③举例
a.要分离耐高温菌,可在 条件下进行培养。
b.要分离对某种抗生素具有抗性的菌种,可在加有 (如链霉素或青霉素)的平板上进行分离。
c.在培养基中加入质量分数为10%的酚,可以抑制 的生长。
d.运用将 作为唯一碳源和能源的培养基,可以有效地分离能分解纤维素的细菌。
e.运用 培养基(培养基完全不含氮元素),可选择能固氮的细菌。
f.运用只含尿素而不含其他氮元素的培养基,可以选择__________________
的微生物(能合成脲酶的微生物可以分解尿素)。;3.观察各种微生物形成的菌落
(1)菌落:指 微生物在适宜的 表面或内部生长、繁殖到一定程度,形成 、有一定 的子细胞生长群体。
(2)菌落特征: 微生物在 培养基上生长形成的 一般都具有稳定的特征,如菌落的大小、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等,这些可以作为对微生物进行 、 的重要依据。;;2.结合教材完善下图中两种分离和纯化微生物的平板分离法并思考:;(1)涂布平板法的实质是什么?
答案 在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。;(2)试比较两种分离和纯化方法;3.选择培养分离所利用的培养基是什么培养基?它利用的原理是什么?
答案 选择培养分离所利用的培养基是选择培养基。它利用的原理是不同的微生物有不同的营养需求或对某种化学物质有不同的敏感性。
4.通常以菌落的哪些表观特征来对微生物进行分类、鉴定等?
答案 菌落的大小、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等。;;(3)平板划线法和涂布平板法的比较;;解析 涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。用不同稀释度的菌液接种,只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,才能够在培养基表面形成单个菌落,而不是所有培养基上均可出现单个菌落。;;2.从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从 (填“高盐”或“低盐”)环境采集,培养厌氧菌的菌样应从 (填“有氧”或“无氧”)环境采集。
解析 在长期自然选择的作用下,生物与其生活环境相适应,培养嗜盐菌的菌样应从高盐环境中采集,培养厌氧菌应从无氧环境
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