快检方法及在畜牧业中的应用.pptx

快检方法及其在畜牧业中的应用江西省兽药饲料监察所 杨琳芬1. 快速检测方法的重要性 在食品安全检测中，尽管大型精密仪器具有高灵敏度、高选择性和高准确性等特点，但是随着样品数量的增加和检测时效性要求的提高，快速检测方法以其简便、快速等特点，具备大型仪器所不能取代的作用，越来越受到食品安全监管部门和检测部门的重视和青睐。2. 快速检测技术的分类1、化学比色法2、胶体金免疫层析技术现场快速检测技术3、荧光免疫层析技术1、Elisa酶联免疫吸附技术2、同位素内标稀释技术3、分散固相萃取技术实验室快速检测技术快速检测技术4、红外及拉曼光谱技术传感器技术在线快速检测技术…… ……2.1 现场快速检测技术 （1） 化学比色法 化学比色法是利用能够迅速产生明显颜色变化的化学反应检测待测物质，通过与标准比色卡进行目视定性或半定量分析。 主要用于农药残留、亚硝酸盐、甲醛、吊白块等方面的检测，现在部分微生物指标如大肠杆菌、金葡菌的检测也有相关的应用。常用设备：农残速测仪、农残速测卡片人员技能要求：简单培训一般操作：（1）将蔬菜或农畜产品剪碎，加入蒸馏水，搅匀后滴加数滴于纸片上；（2）将纸片放入仪器内反应一段时间后，和标准纸片进行颜色对比，判断结果。优点：方法简单，检测人员无需具备专业技能，经过简单培训即可操作缺点：准确度差，对于含有挥发性组份的样本易出现假阳性，疑似阳性样品需要仪器进行进一步确证农残速测仪农残速测卡片（２）胶体金免疫层析技术 胶体金免疫层析技术是动物源性食品中非法添加物和兽药残留最常见的快速检测方法之一，其原理是将待检样本加到试纸条上后，通过毛细管作用向前移动，与结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。 主要用于非法添加物、兽药残留、农药残留、真菌毒素等方面的检测，应用广泛。常用设备：胶体金免疫层析试纸条人员技能要求：简单培训一般操作：（1）取蔬菜或农畜产品或匀浆液数滴，滴到试纸条小孔内；（2）等待约5min，读取结果优点：方法快速、简单，无需专业技能缺点：部分指标灵敏度不够高，有假阳性，疑似阳性样品需要仪器进行进一步确证。胶体金免疫层析试纸条（3）荧光免疫层析技术 荧光免疫层析技术是在传统的免疫胶体金法上发展起来的，它通过将荧光发光基团与抗体相结合，并通过荧光读数仪可以实现快速测定。由于荧光强度可精确定量，因此可以将其与物联网和大数据技术结合起来，构建快速检测数据网络系统。 主要用于非法添加物、兽药残留、农药残留、真菌毒素等方面的检测，应用前景广泛。常用设备:荧光免疫层析试纸条，荧光免疫分析仪人员技能要求：简单培训一般操作：（1）取蔬菜或农畜产品或匀浆液数滴，滴到试纸条小孔内；（2）等待约2min后，插入仪器，读取结果，上传数据优点：方法快速、简单，无需专业技能，灵敏度较高，可实现数据库管理和交换缺点：假阳性，疑似样品需要仪器进一步确证荧光免疫层析分析仪基于荧光免疫层析技术构建质量安全追溯系统现场快速检测技术小结 现场快速检测技术的普遍优点是检测结果迅速、无需专业技术人员、不需要或只需要简单仪器设备就能够实现在采样现场或附近进行样品快速测定； 其普遍的缺点是：定性和定量均不够准确，有假阳性(一般无假阴性），疑似阳性的结果需要用专业仪器进行进一步确证；2.2 实验室快速检测技术（1）Elisa酶联免疫吸附技术 Elisa酶联免疫吸附技术是在分析实验室中应用最广泛的样品快速筛选方法之一。通过使用相对应的Elisa酶联免疫试剂盒对病源微生物、非法添加物、农残、兽残、真菌毒素以及抗原抗体等。其原理是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，并使酶标记的抗原抗体在固相表面进行反应，并呈现一定的颜色或紫外吸收特性。常用设备:酶联免疫试剂盒、酶标仪、洗板机、多通道移液器,如果需要进行样品前处理，还需要离心机，振荡器，氮吹仪等前处理设备人员技能要求：具备一定的免疫专业知识，掌握一定的测试基础一般操作：（1）样品经过提取后，取标样、样品提取液加入到酶标板；按照酶联免疫试剂盒中说明书要求加入酶标记物、抗体等操作，最终反应显色。（2）将酶标板放入酶标仪中读数，分析结果优点：能够一次性处理大批量样本，结果数字化，相对准确，较仪器分析简单。缺点：人员素质有一定要求，操作较复杂，存在假阳性酶联免疫试剂盒酶标仪（2）同位素内标稀释技术 同位素内标稀释技术是近年来较为热门的快速前处理技术，其通过简单提取并使用13C等同位素内标进行校正，最后通过三重四极杆或高分辨质谱进行分析，可以极大的简化前处理时间，缩短分析时间，实现高通量的准确定性定量。所需设备和耗材：质谱仪，离心机、振荡器、氮吹仪等前处理设备，同位素内标。人员技能要求：具备较强的专业技能