样 本 的 采 集课件.ppt

样 本 的 采 集;（一）检出卫生指标微生物的样本来源和种类 卫生指标微生物是指示外环境和食品以及日用品洁净度的微生物可以是单位容积或重量中所含微生物的总数或是以某种代表微生物，它是指示受病原微生物污染情况，如大肠埃希氏菌，粪链球菌和产气荚膜梭菌等，样本的来源是空气、水、食品、药品、化妆品及医院环境等。;1. 水样本的采集及处理 ①采样的容器水样瓶采集前必须进行灭菌并保证在运送保存过程中不受污染。 ②在采集自来水样时，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒、然后将龙头打开，放水5~10分，再采集水样。 ③取外环境水样时，应选择有代表性的水源，一般应距水面10~15cm深处取样。;④采集有余氯的水样时，应按每500ml水样加入1.5%硫代硫酸钠2ml，中和水样中的余氯。 ⑤采水量为瓶容量的80%，以便在检验时充分震摇水样。 ⑥水样作大肠菌群检测时，取水量为350ml。;⑦水中病毒检测样本的采集（1）水中病毒数>103/L可直接将水样接种细胞无需浓缩，病毒数>102/L样本量为1~5L，=10/L，样本量为10~20L，<1/100L样本量是500~1000L，（2）每次采2份样本，一份及时检测，一份低温保存备用。（3）如为间断污染，采水样时同时还应考虑采集水体底泥及水生生物，特别是贝类样本，因底泥及贝类中病毒可长期存在，并且浓度较高。;2. 食品中细菌检测的样本采集 食品采集是指在食品原料或成品中抽取具有代表性的样品，并保证这些具有代表性的样本在检验时能完全反映原来的样本状态（在采集与运输过程中排除外界各种干扰），使最终检测结果真实地反映食品本来的卫生状况，因此在作食品细菌学检验中，采样必须注意以下问题：;①平均样品：粮按三层（表、中、下）五点采样法，油抽取表层与底层油、混样检测。 ②正常样品与异常样品，除采正常样品外，如发现有异常样本时，也应采样分别进行检测。 ;③采样数量：一般采集中样，即从食品的各部分取得的混合样品以200克为准。有些样品可达500克。如粮食可分三层五点，或分层随机采取不同点的样品充分混合后取500克送检。检样也称小样以25克为准。 ④避免外源性污染，各种采样器、样品容器都需严格灭菌，尽可能从未开启的样品中采样。尽量选样清洁的空间地点，以无菌操作的方式，开启包装，采集样品装入灭菌容器内并将容器密封。; ⑤防止样品中细菌的菌量及菌相的变化，为了防止样本中细菌的变化，必须严格控制温度，从采样到检验室时间不得超过了3小时，最适温度为0℃~4℃，如为冷冻样品则仍需保持在冷冻状态。 ⑥要有明确的标签：样品必须立即贴上标签，表明品名、来源、数量、采样地点采样人及采样年月日地点，必要时注明采样温度、湿度及现场卫生状况，是否无菌操作。;⑦国际食品微生物专门委员会（ICMSF）提出食品采样进行检验，应从统计学原理为基础，来考虑对一批食品应检测多少样本，才能具有代表性？目前一般使用的方法是每批样品中只采一个检样进行检验，该批食品是否合格全由一个样品的结果来决定。;目前世界粮农组织已采用ICMSF提出的建议作为规定，其中食品中大肠菌群数的检验为一批食品中应采5个样进行检验，而沙门菌则要采10个样来综合判断其卫生状况，现已有加拿大、以色列等国采用此法，作为该国的国家标准。;世界粮农组织规定的各种食品微生物的限量标准;（二）病原微生物样本的采集 1. 血液样本的采集 （1）血液样本中可能有的细菌 金色葡萄球菌、链球菌、产单核李斯特菌、炭疽杆菌，脑膜炎奈瑟菌、伤塞及副伤塞沙门菌，绿脓杆菌，气单胞菌，鼠疫耶尔森菌、布鲁菌、钩端螺旋体等。;（2）样本采集及应注意事项 ① 采血时期及次数，对血液标本的细菌培养是否能检出病原菌的影响较大。一般情况下，多在病人发热初期或发热高峰时采集。原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已用药而不能中止的病人，也应在下次用药之前采集。于用药前24小时内，如采集3~4次血液标本，其检出率可达90%以上。; 为了获得正确而检出率高的效果，最好同时采集动脉血和静脉血，或由左右两侧肘静脉同时采集。因为采集部位不同，其血液中的菌数常可不同；同时双部位的标本培养对于检出菌是病原菌，或为污染菌的判定有所帮助。此外，在感染病灶局部附近的血管采集标本，也能提高检出率。;② 采血部位，一般多由肘静脉采集。采血量一般以培养瓶中培养基量的1/10为宜，如此可使存在于血液中的补体、抗体、调理素及溶菌酶等增殖抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。对于应用抗菌药物中的病人血液，以培养基量的1/20为宜。成人一次采血为5~10ml，婴幼儿为1~2ml。;采血部位的局部皮肤应彻底消毒，通常先用碘酒棉涂布消毒，干后消毒酒精（70