HPV与宫颈癌和HPV基因芯片检测.ppt

亚能生物 人乳头瘤病毒（Human Papillomaviruses, HPV） 双链DNA无包膜病毒 环状DNA，约8Kb； 病毒颗粒直径为50～55nm； 依靠宿主细胞进行复制、转录和翻译。 HPV感染率 最常见的低危型（HPV6、11） 最常见的高危型（HPV16、18、31、33、45、58 ） HPV基因结构 按功能可分为早期区(E区)、晚期区(L区)和非编码区 （ LCR）三个区域。 E区分为E1～E7开放阅读框架，主要编码与病毒复制、转录、调控和细胞转化有关的蛋白（ HPV无E3）。 L区分L1和L2，分别编码主要衣壳蛋白和次要衣壳蛋白。 LCR是E区与L区间-6.4～1.0Kb的DNA片段，可负责转录和复制的调控 HPV的致癌机理 HPV以游离态感染上皮细胞后，可以持续存在于染色体外，不引起任何病变，或引起良性病变和低度病变，如尖锐湿疣或轻度不典型增生等。而癌变则与病毒DNA整合入宿主染色体密切相关。 高危型HPV DNA链通常在E1或E2的开放读码框内断裂，使HPV DNA整合入染色体脆弱区。E6和E7具有促进和维持整合状态的功能。 HPV E6蛋白间接抑制 p53活性，阻碍细胞对DNA损伤的反应。（负向调节细胞的生长和分化） HPV E7蛋白与pRb结合后使其功能失活，改变细胞周期的正常调控。 中国癌症研究基金会（CCRF）宫颈癌筛查及早诊早治指南 筛查方案：基本方案：肉眼观察＋冰醋酸试验（碘液试验） 一般方案：pap smear+HPV检测 最佳方案：TCT+HPV检测 随访对象：细胞学低度病变、CIN I以上者、“特殊职业”妇女人群、年龄 30 岁以上的高危HPV感染者，每年定期随访检查。 注意事项： 1、月经来潮后10～18天为最佳检查时间 2、检查前48h内不要做阴道冲洗，不用使用阴道内用药物 3、检查前48h内不要行性生活 宫颈癌的常规临床检测方法 临床检查：如肉眼观察、阴道镜等 操作简便，但准确率和特异性有待提高（50-70％） 细胞学检测：观察宫颈上皮细胞的变异，常见方法有：巴氏涂 片、LCT、 TCT等 1）长期宫颈糜烂可导致宫颈上皮细胞形态变异，但非HPV引起的细胞形态异常与宫颈癌病变没有直接联系。 2）在感染早期，细胞往往不会出现形态变化，但此时HPV对细胞内遗传物质的损伤可能已经产生。 病毒学检测：HPV DNA检测（PCR方法），常见方法有：基因芯 片分型检测、荧光PCR等 特异性强、灵敏度高，操作简便快捷 (98%) HPV基因分型快速诊断试剂 应用膜杂交技术建立的敏感、特异、简便的检测方法，可同时对23种HPV亚型 (18种高危型及5种低危型)进行检测。 结果判断 谢谢！ （一）宫颈病变的筛查 1、HPV检测的最大优势之一在于发现高危型HPV阳性而细胞学涂片正常的妇女，因为这一人群中10％会在四年内发展成CINⅢ。 2、筛查并浓缩高风险人群，便于进行有效监控，早期发现宫颈癌。 3、HPV检测的阴性预测值为99％，可将筛查间隔延长至3年一次，大大地降低了检查成本。 敏感性：88－100％ 特异性：98％ 阴性预测值：几乎100％ HPV检测的临床意义 * * 子宫颈癌与人乳头瘤病毒（HPV）的研究进展 一、宫颈癌的概述及其病因学研究进展 二、HPV的生物学研究 三、宫颈癌的早期筛查 四、宫颈病变的治疗 一、宫颈癌的概述及其病因学研究进展 宫颈癌－－最常见的妇科恶性肿瘤 据世界范围内统计，每年大约有50万左右的宫颈癌新发病例，占所有癌症新发病例的5%，其中80%的病例发生在发展中国家。我国每年宫颈癌新发病例约13.15万，占世界宫颈癌新发病例总数的28.8% ，发病率仅次于乳腺癌位居第二。 随着筛查制度的建立，世界宫颈癌的发病率和死亡率已经大幅下降。我国由70年代的10.28/10万下降到90年代的3.25/10万，但在高发病区，死亡率仍高居不下。 36.00 山西阳城 3.8 上海 2.54 北京 3.25 中国 8.00 世界 死亡率 (/10万） 地区 患病年龄更趋于年轻化（发病年龄提前到45岁），发病史缩短。如吉林省在80年代统计宫颈癌 患者中小于35岁的妇女占4.8％，而2000年已经占到34.1％ 子宫颈癌的危险因素： 行为危险因素：如性生活过