靶向于IL15受体的人源化重组毒素的研究.pdf

中英文摘要 靶向于ILl5受体的人源化重组毒素的研究 研究生刘芳 指导老师毛晓华副教授 东南大学基础医学院 生物化学与分子生物学系 中文摘要 日的：一些恶性肿瘤如成人T淋巴细胞性白血病和骨髓瘤细胞表面含有丰富的ILlj 受体(1I。15R)，炎症性自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎、克隆氏病等 也都发现活化的ILl5R阳性T淋巴细胞的浸润和聚集。II．15及ILl5R阳性细胞在这些疾 表达两种具有低免疫原性、低TNF。全身性毒副作用的融合毒素，为研制特异的j玎消除 ILl5受体高表达细胞的导向药物奠定基础。方法：通过RT PCR从人胎盘组织叶]克隆山 hILl5成熟肽eDNA，并进一步删去5 7端前8个氨基酸残基的编码序列获得对靶细胞不 诱导表达，Ni—NTA亲和层析纯化出两种融合蛋白，即hILl PAGE 切分析和DNA序列分析，所构建的两个重组质粒均正确插入了各自的融合基因。SDS 分析表明，上述两种重组菌株诱导后分别表达与融合蛋白hlLl5／TNF。M和hlLl 5M／TNF。 变性条件下从大肠杆菌中纯化出两种融合蛋白，以半数杀伤浓度(ICj。)为指标，复性 。，阮明两种融合蛋白均可以靶向高表达hlLl5R的细胞，增强TNF。局部的细胞毒作用， 对活化T细胞介导的炎症性自身免疫性疾病或高表达ILl5R的恶性肿瘤具有潜在的治疗 提示剥靶细胞不具有激动效应的ILl 床应用静景。 关键词：基因重组、人白介素15、TNF。、蛋白融合、表达 ——垄堕叁兰塑±竺堡堡兰—— FUSION RECOMBINANT AHUMANIZED CELLS TARGETING TOXIN ———————_——————————_—————^——+——‘——————一 1 RECEPTORS 5 INTERLEUKIN BY UU Fang by Supervised Xiao—hua AssociateProfessorMA0 of MedicaIScience SchoolBasic Southeast University abstract of cellSadultT—cell