先天性心脏病重度肺动脉高压血浆microRNA的分析与验证_张明杰.pdf

·论著· 先天性心脏病重度肺动脉高压血浆 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 的 分析与验证 张明杰 　 徐卓明 　 朱丽敏 　 龚霄雷 　 黄 　 蕊 　　 【摘要】 　 目的 　 应用 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 芯片技术比 较 先 天 性 心 脏 病（ ＣＨＤ ）术 后 可 逆 性 肺 动 脉 高 压（ ＰＡＨ ）和 不 可逆性 ＰＡＨ （ ｉＰＡＨ ）患 儿 血 浆 中 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 的 表 达 谱，旨 在 发 现 能 够 区 别 ＰＡＨ 与 ｉＰＡＨ 的 特 异 性 的 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 。方法 　 选取 ２０１１ 年 １０ 月 １ 日 －２０１２ 年 ９ 月 ３０ 日在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 就诊的 ＣＨＤ 相关性 ＰＡＨ 患儿 ４０ 例，治疗后 ６ 个月根据平均 肺 动 脉 压 力（ ｍＰＡＰ ）将 患 儿 分 为 ３ 组： ｍＰＡＰ ≥ ５０ｍｍＨ ｇ （ １ｍｍＨ ｇ ＝０．１３３ｋＰａ ）为 ｉＰＡＨ 组（ １２ 例）， ｍＰＡＰ 　 ２５ ～＜ ５０ｍｍＨ ｇ 为 可 逆 性 ＰＡＨ 组（ ＰＡＨ 组， １５ 例）， ｍＰＡＰ ＜ ２５ｍｍＨ ｇ 为对照组（ １３ 例）。取 １０ 例患儿（对照组 ３ 例， ＰＡＨ 组 ３ 例， ｉＰＡＨ 组 ４ 例）的血浆标 本进行 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 芯片分析，取剩余 ３０ 例患 儿（对 照 组 １０ 例， ＰＡＨ 组 １２ 例， ｉＰＡＨ 组 ８ 例）的 血 浆 标 本 进 行 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 芯片结果的验证。结果 　 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 芯片分析结果显示， ｉＰＡＨ 组表达上调的 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 有 ７ 个，分 别 为 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ３０１ａ － ３ ｐ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １４５ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １２６ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ２６ａ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ３７４ａ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ３４ａ ；表达下调的 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 有 ３ 个，分别为 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ２０ｂ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ５００ａ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ５０１ － ３ ｐ 。选 取表 达 差 异 最 显 著 的 ５ 个 ｍｉｃｒｏＲＮＡ （ ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ３０１ａ － ３ ｐ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １４５ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １２６ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ２６ａ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － ３７４ａ ）进行实时荧光定量聚合酶链反应验证，结果与芯片结果基本相符合， ｉＰＡＨ 组 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １４５ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １２６ 的表达显著升高，分别为 ＰＡＨ 组的 ３．００ 、 ２．６６ 倍。结论 　 通 过 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 芯 片 筛 选 和 进 一 步 的验证， ｉＰＡＨ 患儿血浆中 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １４５ 、 ｍｉｃｒｏＲＮＡ － １２６ 表达显著升高，可以作为区分 ＰＡＨ 与 ｉＰＡＨ 的血浆 生物标志物。 【关键词】 　 肺动脉高压；先天性心脏病；生物标志物；筛选 　　 作者单位： ２００１２７ 　 上海，上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心胸外科 通信作者：徐卓明，电子邮箱为 ｚｍｘ ｙ ｆｂ ＠ ａｌｉ ｙ ｕｎ．ｃｏｍ Ａｎａｌ ｙ ｓｉｓ 　 ａｎｄ 　 ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ 　 ｏｆ 　 ｐ ｌａｓｍａ 　 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 　 ｉｎ 　 ｓｅｖｅｒｅ 　 ｐ ｕｌｍｏｎａｒ ｙ 　 ｈ ｙｐ ｅｒｔｅｎｓｉｏｎ 　 ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ 　 ｗｉｔｈ ｃｏｎ ｇ ｅｎｉｔａｌ 　 ｈｅａｒｔ 　 ｄｉｓｅａｓｅ 　 ＺＨＡＮＧ 　 Ｍｉｎ ｇｊ ｉｅ ， ＸＵ 　 Ｚｈｕｏｍｉｎ ｇ ， ＺＨＵ 　 Ｌｉｍｉｎ ， ＧＯＮＧ 　 Ｘｉａｏｌｅｉ ， ＨＵＡＮＧ 　 Ｒｕｉ． 　 Ｄｅ ｐ ａｒｔｍｅｎｔ 　 ｏｆ 　 Ｃａｒｄｉａｃ 　 Ｓｕｒ ｇ ｅｒ ｙ ， Ｓｈａｎ ｇ ｈａｉ 　 Ｃｈｉｌｄｒｅｎ ’ ｓ 　 Ｍｅｄｉｃａｌ 　 Ｃｅｎｔｅｒ ， Ｓｈａｎ ｇ ｈａｉ 　 Ｊｉａｏｔｏｎ ｇ 　 Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ ｙ 　 Ｓｃｈｏｏｌ 　 ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ， Ｓｈａｎ ｇ ｈａｉ 　 ２００１２７ ， Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓ ｐ ｏｎｄｉｎ ｇ 　 ａｕｔｈｏｒ ： ＸＵ 　 Ｚｈｕｏｍｉｎ ｇ ．Ｅ － ｍａｉｌ ： ｚｍｘ ｙ ｆｂ ＠ ａｌｉ ｙ ｕｎ．ｃｏｍ 　　 【 Ａｂｓｔｒａｃｔ 】 　 Ｏｂ ｊ ｅｃｔｉｖｅ 　 Ｔｏ 　 ｃｏｍ ｐ ａｒｅ 　 ｔｈｅ 　 ｅｘ ｐ ｒｅｓｓｉｏｎ 　 ｏｆ 　 ｐ ｌａｓｍａ 　 ｍｉｃｒｏＲＮＡ 　 ｂｅｔｗｅｅｎ 　 ｐ ａｔｉｅｎｔｓ 　 ｗｉｔｈ 　 ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ