3第三章 血液分析仪检验 PART1.ppt

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(2)其他白细胞分类通道:检测除嗜碱性粒细胞以外的各类白细胞。结合了钨光源流式细胞光吸收、化学染色和电阻抗法(图3-26)。 DHSS采用2个鞘流装置分析细胞内部结构(图3-27)。双矩阵LIC散点图可将幼稚细胞分为3个亚群(图3-28)。 图3-26 白细胞分类计数散点图 图3-27 双鞘流图 图3-28 双矩阵巨大未成熟细胞(LIC)散点图 (IMG:未成熟粒细胞,IMM:未成熟单核细胞,IML:未成熟淋巴细胞) 四、血液分析仪检测参数及原理 不同类型血液分析仪检测参数的原理不尽相同。高档仪器应用2种或2种以上检测原理,组合电学、光学、细胞化学等技术,在独特检测通道测定红细胞、血小板和白细胞系列的数量、亚类及相关参数(表3-4、表3-5)。 第二节 血液分析仪检测参数和结果显示 一、血液分析仪检测参数 血液分析仪检测参数包括:临床报告参数、异常报警或研究参数、仪器内部监测参数3类。血液分析仪检测的总体目标有2个:一是筛检和直接报告正常检验结果,二是在出现异常结果时,直接向检验人员报警。 随着检测技术的发展和临床循证检验医学证据的建立,目前用于报警和研究的参数,有可能转为能应用于临床检测的新参数。 二、血液分析仪结果显示 血液分析仪检测标本后,结果显示通常有3种形式:数据、图形和报警。 (一)数据 凡可向临床报告的检测参数,一般均以检验报告单的形式显示,可按原样和特殊格式打印,并向临床发出或传送结果。 当检测结果超出参考区间时,仪器会给予符号标记(↑表示增高,↓表示降低),或用特定颜色(如红色表示增高,蓝色表示降低)加以提示。 对于无法直接报告的结果,也有相应的符号提示。有报警或结果异常的参数,经检验人员复查、确定后,方可发出报告。 第三章 血液分析仪检验 自动血液分析仪(AHA)[血细胞计数仪(blood cell counter)] ,是临床检验最常用的筛检仪器之一 。 传统的显微镜血细胞计数或分类方法: 速度慢、误差大、影响因素多,且难以满足临床大量标本检测需求。 AHA可进行: ①全血细胞计数及其相关参数的计算。②白细胞分类。③血细胞计数和分类的扩展功能,包括:有核红细胞计数、网织红细胞计数及其相关参数检测;幼稚粒细胞、未成熟粒细胞、造血干细胞计数;未成熟血小板比率;淋巴细胞亚型计数;细胞免疫表型检测等。 第一节 血液分析仪的检测原理 现代血液分析仪综合应用了电学和光(化)学两大原理,用以测定血液有形成分(细胞)和细胞内容物(血红蛋白)。 电学检测原理包括电阻抗法和射频电导法; 光(化)学检测原理包括激光散射法和分光光度法。 激光散射法检测的对象有2类:染色的和非染色的细胞核、胞质颗粒等成分。 一、电学检测原理 1.电阻抗法 即库尔特原理(图3-1)。电阻抗法是三分群血液分析仪的核心技术,可准确测出细胞(或类似颗粒)的大小和数量。 电阻抗法还与其他检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。 图3-1 电阻抗法细胞计数原理 为提高计数准确性,部分仪器还采用3次计数、扫流和拟合曲线等技术进行血小板计数(图3-3)。电阻抗法还可用于白细胞计数及白细胞三分群分析。 例如,电阻抗法红细胞计数和血小板计数是在相应通道内进行计数,并根据二者体积不同,采用浮动界标法进行区分(图3-2)。 图3-2电阻抗法正常红细胞直方图 图3-3 电阻抗法正常血小板 计数和拟合曲线直方图 2.射频电导法 高频电流能通过细胞膜,用高频电磁探针渗入细胞膜脂质层,测定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、胞核和胞质(如比例)、颗粒成分(如大小和密度)等特征性信息。 电导性特别有助于鉴别体积相同、但内部结构 不同的细胞(或相似体积的颗粒。 图3-4 射频电流检测原理 (二)光(化)学检测原理 1.激光散射法 将稀释、染色(化学染色或核酸荧光染色)、球形化的细胞悬液注入鞘液流中央,单个细胞沿着悬液和鞘液流 两股液流整齐排列,以恒定流速定向通过石英毛细管,即流体动力学聚焦技术(图3-5) 。 图3-5 鞘流技术 当细胞(或颗粒)通过激光束被照射时,因其本身的特性(如体积、染色程度、细胞内容物大小及含量、细胞核密度等),可阻挡或改变激光束的方向,产生与其特征相应的各种角度的散 射光(表3-1)。放置 在石英毛细

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