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课程网址 构型(configuration)和构象(conformation) Configuration:The geometrical arrangement in polymers arising from the order of atoms determined by chemical bonds. Conformation:The geometrical arrangement in polymers arising from rotation about adjacent carbon-carbon single bonds. 构型的改变,分子中一定会有共价键的断裂和新的共价键的生成;而构象的改变不需要共价键的变换 构型异构体还是构象异构体? 构型异构体还是构象异构体? Techniques in receptor research 尹长城 北京大学医学部生物物理学系 3. 受体与配基结合的动力学 3.1 受体放射配基结合分析 60年代初在受体研究中采用放射性标记核素 并建立了受体放射配基结合分析 (radioligand binding assay, RBA),它的理论基础是占领学说 该理论认为 受体与配基以单分子相互结合(分子比为1:1) 反应服从质量作用定律, 反应是可逆的 配基在结合和解离后不被代谢,也不与其它类型受体结合 受体与配基结合后产生的生物效应的强度与受体被占领的量成正比 3.1 单位点受体与配基结合反应的数学表达 受体与配基结合作用的反应式如下: 根据质量作用定律,结合反应速率为 v1= k1[R][L], 解离反应速率为 v2= k2[RL] 当反应达到平衡时, v1= v2,所以 (1) [R]、[L]、[RL]分别为游离受体、游离配基、受体-配基复合物的摩尔浓度 k1、k2分别是结合速率常数、解离速率常数 Kd是解离平衡常数,单位为mol/L; Kd值的大小作为衡量配基与受体相互结合能力的一个重要物理量: Kd值愈小结合能力愈大; Kd又称为亲和常数 3.1 单位点受体与配基结合反应的数学表达 设:[RT]为受体的初始浓度 (2) 重排并整理得: (3) 上式即Scatchard方程 ,以[RL]/[L]为纵轴,以[RL]为横轴作图得一直线 直线斜率为-1/Kd, 横轴截距为[RT], 纵轴截距为[RT]/Kd Scatchard图 3.1 单位点受体与配基结合反应的数学表达 同理可推出: (4) 上式为Woolf方程:以[L]/[RL]为纵轴,以[L]为横轴作图得一直线 直线的斜率为1/[RT], 横轴截距为-1/Kd, 纵轴截距为Kd/[RT] Woolf图 3.1 单位点受体与配基结合反应的数学表达 同理还可推出: (5) 上式为Lineweaver-Burk方程,亦称双倒数方程:以1/[RL]为纵轴,以1/[L]为横轴作图得一直线 直线的斜率为Kd/[RT], 横轴截距为–1/Kd, 纵轴截距为1/[RT] Lineweaver-Burk图 3.1 单位点受体与配基结合反应的数学表达 设:[LT]是总配基浓度, [L] = [LT] – [RL], 将 [L] = [LT] – [RL] 和 [R] = [RT] – [RL]代入(2)式,经整理得: (6) 上式为以[RL]为变量的双曲线一元二次方程 当[RT]、Kd固定时,[RL]随[LT]的变化而变化,开始上升很快,以后逐渐趋向水平,这就是饱和曲线 受体与配基结合曲线 SB为特异性结合,NSB为非特异性结合,TB为总结合 [SB]= [TB] – [NSB] 3.1 单位点受体与配基结合反应的数学表达 将(1)式重排变成下式: (7) 设[RL] = ?[RT
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