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显微镜直接计数法
菌种•酿酒酵母(Saccharomyces
cerevisiae)
实验材料仪器•显微镜，血球计数板
染料•美兰染液、40%甲醛
1.视待测菌液浓度，加水、美兰、甲醛作适当稀释，以每小
实验步骤格的菌数可数为度，应当稀释到每各中格30-100的酵母。
2.取洁净的血球计数板一块，在计数室上盖上一块盖玻片。
3.将酵母菌液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两
滴加菌悬液侧的斜面内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴，使菌液沿两玻
片间自行渗入计数室。
4.静置约5分钟，计数左上、左下、右上、右下、中央的4
个中格的酵母菌数。如菌体位于中格的双线上，计数时则
数上线不数下线，数左线不数右线。凡酵母菌的芽体达到
母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。
计数
计数
Rouge,M.CountingCellswithaHemacytometer.2002
5.计算出每毫升菌液所含酵母菌细胞数。
中格1中格2中格3中格4中格5稀释倍数
计数室1
计数室2
结果计算每个大方格边长为1mm，面积为1mm2，
盖上盖玻片后，盖玻片与计数室底部之间的高度为0.1mm，
所以每个计数室(大方格)的体积为0.1mm3，
每毫升菌液含菌数＝中格酵母细胞平均数×25×10000×稀
释倍数
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