(3.22)--[10.3] 霉菌的形态观察 实验步骤.pdf

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霉菌的形态观察

实验步骤

黑曲霉(Aspergillusniger)产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)

常见霉菌形态

毛霉(Mucor)根霉属(Rhizopus)

载玻片湿室培养观察法

菌丝直接观察法

实验方法

GB4789.16

简易观察法

•在培养皿底部铺一张圆形滤纸片,滤纸片上

依次放上“U”形载玻片搁架、载玻片、盖玻

片(两片),盖上皿盖,外用纸包扎,高压

1.准备湿室灭菌后,60℃烘箱干燥,备用。

载玻片湿室培

养观察法•用接种环挑取少量待观察的霉菌孢子,置于

湿室的载玻片上,每张载玻片可接同一菌种

的孢子两处。

2.取菌接种•接种时只要将带菌的接种环在载玻片上轻轻

碰几下即可。

•用无菌细口滴管吸取少许融化并冷却至45℃的培养基,滴加到载玻

片的接种处,培养基应滴得圆而薄,直径约为0.5cm,注意无菌操

3.加培养基作。

•在培养基未彻底凝固前,用无菌镊子将皿内的盖玻片盖在琼脂薄层

上,用镊子轻压盖玻片,使盖玻片和载玻片之间的距离相当接近,

4.加盖玻片但不能压扁。

载玻片湿室培

养观察法•每皿倒入约3mL20%的无菌甘油,使皿内滤纸完全湿润,以保持皿

内湿度,盖上皿盖。制成载玻片湿室,28℃培养。

5.倒保湿剂

•将培养好的载玻片取出,置于显微镜下直接观察。

6.观察

载玻片湿室培

养观察法标本片可直接在显微镜下观察,这种培养观察方法

保持了霉菌的自然生长状态,尤其适用于根霉的假

根、匍匐菌丝,曲霉的足细胞的观察,并且还可在

同一标本片上观察霉菌的不同生长阶段的形态。

优点

1.于洁净载玻片上,滴一滴乳酸石炭酸棉兰染液于载片中央;

2.用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝;

菌丝直接观察3.先在50%乙醇中浸润,再在蒸馏水中浸润,

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