(2.11)--[4.2]chapter4(2)酶工程酶工程酶工程.ppt

1第四章酶的提取分离纯化

酶的提取与分离纯化是指将酶从细胞或其他含酶原料中提取出来，再与杂质分开，而获得所要求的酶制品的技术过程。主要包括细胞破碎、提取、离心分离、过滤与膜分离、沉淀分离、层析分离、电泳分离、萃取分离、浓缩、干燥、结晶等。2第四章酶的提取分离纯化机械破碎物理破碎化学破碎酶解破碎酸溶液提取碱溶液提取盐溶液提取有机溶剂提取沉淀分离、离心分离膜分离、层析分离电泳分离、萃取分离结晶、干燥浓缩

3第五节.过滤与膜分离过滤是借助于过滤介质将不同大小、不同形状的物质分离的技术过程。根据截留物质颗粒大小不同，过滤可以分为粗滤、微滤、超滤和反渗透。类别截留颗粒大小截留的主要物质过滤介质粗滤2μm酵母、霉菌、动物细胞、植物细胞、固形物等滤纸、滤布、纤维多孔陶瓷、烧结金属等微滤0.2～2μm细菌、灰尘等微滤膜、微孔陶瓷超滤20?～0.2μm（1*103-5*105）病毒、生物大分子等超滤膜反渗透20?生物小分子、盐、离子反渗透膜超滤

45.1非膜过滤：采用高分子膜外的物质作为过滤介质,包括粗滤和微滤。第五节.过滤与膜分离根据过滤介质的不同，可将过滤分为非膜过滤和膜过滤。

55.2膜过滤：借助于一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术称为膜分离技术。第五节.过滤与膜分离膜分离压力差膜分离微滤（MF）超滤（UF）反渗透（RO）电场膜分离电渗析离子交换膜电渗析扩散膜分离透析

65.2膜过滤：借助于一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒或分子进行分离的技术称为膜分离技术。第五节.过滤与膜分离在酶的分离纯化过程中，通过微滤除去酶液中含有的微生物细胞等。超滤技术不仅用于酶的分离纯化，同时还能达到酶的分离浓缩的目的，特别适用于液体酶制剂的生产。1.对酶的活性无损害，常温常压下即可进行；2.操作简单，能耗低，节约资源，保护环境；类别截留颗粒大小截留的主要物质过滤介质粗滤2μm酵母、霉菌、动物细胞、植物细胞、固形物等滤纸、滤布、纤维多孔陶瓷、烧结金属等微滤0.2～2μm细菌、灰尘等微滤膜、微孔陶瓷超滤20?～0.2μm（1*103-5*105）病毒、生物大分子等超滤膜反渗透20?生物小分子、盐、离子反渗透膜

7讨论：如果你漂流在大海上，周围的水资源只有海水，如何获得饮用水？

8在高浓度水溶液一侧加压，使其与低浓度水溶液侧的压差大于渗透压，则高浓度水溶液中的水将通过半透膜流向低浓度水溶液侧，这一过程称为反渗透。5.2膜分离-反渗透（RO）

9细菌、病毒酶、蛋白质aa、糖、二价盐、维生素游离酸、单价盐水微滤反渗透超滤纳滤

101、海水淡化2、纯净水生产3、污水处理知识扩展：膜分离的具体应用举例

膜分离的具体应用举例——海水淡化112015年7月，三沙市西沙洲，工作人员调试海水淡化设备。2014年1月，三沙市鸭公岛居民用上了海水淡化水

12净水器净水器功能可有效滤除水中的铁锈、砂石及直径大于5μm的杂质;可有效去除水中的细菌、毒素。膜分离的具体应用举例——净水器

酶的提取与分离纯化是指将酶从细胞或其他含酶原料中提取出来，再与杂质分开，而获得所要求的酶制品的技术过程。主要包括细胞破碎、提取、离心分离、过滤与膜分离、沉淀分离、层析分离、电泳分离、萃取分离、浓缩、干燥、结晶等。13第四章酶的提取分离纯化机械破碎物理破碎化学破碎酶解破碎酸溶液提取碱溶液提取盐溶液提取有机溶剂提取沉淀分离、离心分离膜分离、层析分离电泳分离、萃取分离结晶、干燥浓缩

14第六节.层析分离利用混合物中个组分的物理化学性质（分子的大小和形状、分子特性、吸附力、分子亲和力和分配系数等）的不同，使各组分在两相中的分布程度不同而达到分离的目的。流动相固定相

15第六节.层析分离总论

16第六节.层析分离总论1.色谱柱的准备2.固定相的制备3.装柱4.平衡5.上样6.洗脱7.收集洗脱液8.洗脱液分析9.柱的再生10.下一轮上样玻璃色谱柱硅胶凝胶颗粒

17层析方法原理吸附层析吸附剂对不同物质吸附力不同分配层析各组分在两相中的分配系数不同离子交换层析离子交换剂上的活性基团对各离子的亲和力不同凝胶层析各组分相对分子量不同亲和层析分子与配基间专一又可逆的亲和力层析聚焦将两性物质的等电点特性与离子交换层析相结合第六节.层析分离总论

6.1吸附层析18吸附层析是利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物中各组分分离的方法。吸附剂来源丰富、价格低廉、可再生，吸附设备简单。吸附层析是各种层析中最早应用的技术。

196.1.1吸附层析的原理活性炭吸附剂一般是多孔的固体，固体内部分子力是对称的，而固体表面的分子受力不对称，向内一面受到固体内部分子的作用力，就会被吸附到固