多抗制备免疫比浊课件.pptx

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多抗制备免疫比浊;此次试验内容;一、此次试验目标:;沉淀反应(precipitation);分类;思索:抗原抗体反应四大特点?;沉淀反应特点;凝胶内沉淀试验

(gelphaseprecipitation);★依据试验目标与方法不一样,可将固相内沉淀验分为2类:

(一)免疫扩散①单向免疫扩散试验

(singlegeldiffusiontest)

②双向免疫扩散试验

(doublegeldiffusiontest)

(二)凝胶免疫电泳

(gelimmuno-electrophoresis)

;一、单向免疫扩散试验;(二)操作步骤

(平板法);单向辐射状免疫扩散

上排为5个不一样参考,中、下排为患者血清,下排右2为一异常病理血清;(三)方法评价;(四)影响原因;3.抗体稀释度

抗体浓度大,沉淀环小,则敏感度低;抗体浓度小,沉淀环增大,不一样浓度抗原间差异较显著,敏感度高。但沉淀环过大,常造成边缘糊不清,致使测量误差也增大。所以要求在沉淀环清楚基础上加大稀释度以提升敏感度。;二、双向琼脂扩散试验;(二)操作步骤

(平板法);多抗制备免疫比浊;(三)双向免疫扩散试验应用;沉淀线形状、位置与抗原抗体扩散率及浓度关系;2.抗原性质分析;三种扩散基础图型

;3.抗体效价滴定;;4.抗体或抗原纯度判定;双扩散试验优缺点;;

免疫浊度测定

(一)基础原理:;(二)类型;多抗制备免疫比浊;1透射免疫比浊法;方法评价:;2散射免疫比浊法;3免疫胶乳比浊法;(a)带抗体胶乳在波长之内可透过光线;

(b)结合后,则形成光线衰减;方法评价;总评价;(三)免疫比浊法主要影响原因;1抗原抗体百分比;多抗制备免疫比浊;多抗制备免疫比浊;2抗体质量;3抗原抗体反应溶液;4增浊剂使用;此次试验内容;血清采集与处理

取血方法:

血清采集:耳缘静脉取血或颈动脉取血。

血清处理:

取好血后,放入37℃,30min后,使血清充分析出(不能冰冻,不然产生溶血),经3000rpm/5min分离血清,剩下放进-20℃冰箱保留。;试验二、免疫浊度测定

——免疫球蛋白检测

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