核酸检查采集方法.pptx

核酸检查采集方法汇报人：<XXX>2024-01-26

目录contents核酸检查概述核酸采集前准备核酸采集方法核酸提取与纯化核酸检测技术核酸检查质量控制与安全管理

01核酸检查概述

核酸检查是一种通过检测生物体内特定核酸序列的存在、缺失或变异情况，从而判断生物体感染状态、基因型或疾病相关性的分子诊断技术。定义核酸检查主要基于核酸分子杂交、核酸扩增及核酸序列测定等原理，利用特定的引物或探针与待测核酸进行特异性结合，通过检测结合产物的数量或性质来判断待测核酸的存在与否及其数量。原理核酸检查定义与原理

核酸检查应用场景如新冠病毒的核酸检测，用于确诊患者是否感染病毒。通过检测患者的基因变异，为精准医疗和个性化治疗方案提供依据。在食品安全、环境监测等领域，用于检测病原微生物的存在和数量。在法医学领域，用于个体识别、亲缘关系鉴定等。疾病诊断个性化医疗病原微生物检测法医学鉴定

基于核酸分子杂交的原理，利用放射性同位素标记探针进行检测，存在操作复杂、放射性污染等问题。第一代技术荧光定量PCR技术的出现，实现了核酸的实时、定量检测，提高了检测的灵敏度和特异性。第二代技术数字PCR、纳米孔测序等新一代测序技术的出现，进一步提高了核酸检测的精度、速度和通量。第三代技术核酸检查技术发展历程

02核酸采集前准备

询问被采集者是否有发热、咳嗽、乏力等症状，以及是否有接触过疑似或确诊患者。了解被采集者的病史、用药史等相关信息，以便选择合适的采集方法和试剂。对于孕妇、儿童、老年人等特殊人群，需要特别注意采集方法和安全性。了解被采集者情况

0102选择合适采集部位对于不同部位的采集，需要使用不同的采集器材和试剂，确保采集的准确性和安全性。根据被采集者的具体情况和检测目的，选择合适的采集部位，如鼻咽拭子、口咽拭子、痰液、血液等。

确保采集器材和试剂的质量可靠、符合标准，并在有效期内。对于需要冷藏或冷冻保存的试剂，需要提前安排好存储和运输条件。根据所选的采集部位和试剂要求，准备相应的采集器材，如棉签、试管、采血针等。准备采集器材和试剂

03核酸采集方法

咽拭子采集法采集部位咽拭子采集部位为咽部，包括咽后壁、扁桃体隐窝及侧壁等。采集方法患者清水漱口后，由专业人员使用无菌拭子适度用力来回擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁3-5次，收集粘膜细胞。注意事项避免在进食后2小时内进行采集，以免引起呕吐；采样前30分钟请勿吸烟、喝酒或嚼口香糖。

采集方法患者头部后仰，保持不动，由专业人员使用无菌拭子轻轻插入鼻孔至鼻咽部，停留数秒吸取分泌物。采集部位鼻拭子采集部位为鼻咽部分泌物，可通过鼻孔进入。注意事项鼻中隔弯曲患者需选用细长拭子，缓慢插入；有鼻腔手术史、鼻中隔偏曲、鼻炎等患者应提前告知医生。鼻拭子采集法

肛拭子采集部位为肛门周围皮肤或直肠粘膜。采集部位患者取侧卧位或膝胸卧位，暴露肛门，由专业人员使用无菌拭子轻轻旋转插入肛门约2-3cm，或擦拭肛门周围皮肤。采集方法采样前需清洁肛周皮肤；有痔疮、肛裂等患者应提前告知医生。注意事项肛拭子采集法

血液样本通常通过静脉采血获得。采集部位采集方法注意事项患者静坐5分钟后，由专业人员选择合适的静脉进行穿刺，抽取适量血液样本。采血前应保持空腹状态；采血后需按压穿刺点至止血，避免剧烈运动或接触水。030201血液样本采集法

04核酸提取与纯化

化学裂解法01利用化学试剂（如SDS、蛋白酶K等）破坏细胞膜和核膜，使核酸从细胞中释放出来。此方法适用于各种样本类型，但操作繁琐且耗时较长。机械破碎法02通过物理方法（如研磨、超声波等）破碎细胞，使核酸释放出来。此方法适用于硬质组织样本，但可能导致核酸降解。热裂解法03通过加热使细胞膜和核膜破裂，释放出核酸。此方法适用于病毒等无细胞结构的生物样本，但温度控制要求较高。核酸提取方法

利用硅胶柱对核酸的吸附作用，将核酸与其他杂质分离。此方法操作简便，适用于各种样本类型，但回收率可能受到影响。硅胶柱层析法利用磁珠表面的特异性配体吸附核酸，然后通过磁场作用将磁珠与溶液分离。此方法具有高回收率和自动化潜力，但成本较高。磁珠法在核酸溶液中加入乙醇，使核酸沉淀出来。此方法操作简便且成本低廉，但可能受到其他杂质的干扰。乙醇沉淀法核酸纯化技术

在提取和纯化过程中，应尽量减少核酸的暴露时间和次数，以降低降解风险。同时，使用高质量的试剂和耗材也是关键。避免核酸降解为避免外源DNA或RNA的污染，操作环境应保持清洁，使用无DNA/RNA酶的试剂和耗材。保持操作环境清洁在提取和纯化过程中，应严格控制温度和pH值，以确保核酸的稳定性和回收率。控制温度和pH值为确保提取和纯化方法的可靠性，应定期使用标准品或已知浓度的样本进行方法性能验证。定期验证方法性能提取与纯化注意事项

05核酸检测技术

应用范围广泛应用于病原体检测、基因诊断、法