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小鼠骨髓中性粒细胞的分离
实验器材：器械（眼科小直剪2把，小弯镒3把），无菌塑料滴管，15ml离心管，4mlEP管，培养皿，1ml注射器，70um尼龙筛网，低温离心机
试剂：PBS（IX,10X）,HBSS,percoll,percoll储存液（percolklOXPBS=9:1）,percoll溶液（45%,81%,62%,55%,50%,分别用1XPBS稀释Percoll储存液到相应浓度）Histopaquelll9,小鼠中性粒细胞缓冲液（MNB,既含0.1%牛血清白蛋白，1%葡萄糖的HBSS溶液）
材料：8-12周C57小鼠
实验步骤：
.拉颈处死小鼠，分离其胫骨和股骨，用纱布将胫骨和股骨擦干净，置于75%酒精中浸泡5min
.用小直剪剪掉骨髓两端，暴露骨髓腔，用MNB冲洗，每次1mL胫骨冲洗两次，股骨冲洗3次。
.冲洗液用70um尼龙筛网过滤，离心收集细胞，600g4℃lOmin,低减速。
.弃上清，用3ml45%percoll溶液重悬细胞
.Percoll梯度准备：3ml81%,2ml62%,2ml55%,2ml50%percoll溶液
.小心的将细胞悬液置于percoll梯度上，1600g,30min/0C,无制动离心。
.弃掉62%percoll层以上的溶液，收集62%-81%之间的percoll层。
.10mlMNB洗两次，600g,10℃/0min,离心。弃上清，用3mlMNB重悬细胞。
9.将细胞悬液小心得置于3mlHistopaquelll9±,1600g,10℃,30min,无制动离心，去除红细胞层。
.收集1119和MNB之间的细胞层，lOmlMNB洗两次，600g,4℃10min,低减速离心
.按需要将细胞用培养基重悬到一定的浓度。
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