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细胞生物学实验课程简介

课程概述与目标细胞培养技术细胞显微观察技术细胞组分分离与分析技术细胞功能检测技术细胞生物学实验设计与数据分析课程考核与评价标准目录

01课程概述与目标

加深学生对细胞结构和功能、细胞代谢、细胞信号传导等基本概念和理论的理解。提高学生的实验设计、数据分析和解读能力，以及科学思维和创新能力。培养学生掌握细胞生物学基本实验技能，包括细胞培养、显微镜操作、细胞分离和分析等。细胞生物学实验课程的目的

包括细胞培养、显微镜操作、细胞分离和分析等。细胞生物学基本实验技能如细胞膜的通透性、细胞器的分离和鉴定等。细胞结构和功能的实验研究如酶活性测定、基因表达和调控分析等。细胞代谢和信号传导的实验研究培养学生独立思考和解决问题的能力。实验设计、数据分析和解读课程内容与结构

010204实验技能培养目标熟练掌握细胞生物学基本实验技能，能够独立完成实验操作和数据分析。具备实验设计和创新能力，能够针对科学问题提出合理的实验方案。具备科学思维和批判性思维能力，能够对实验结果进行客观分析和解读。具备良好的团队合作精神和沟通能力，能够与团队成员有效协作和交流。03

02细胞培养技术

细胞培养基本原理细胞生长与增殖细胞在适宜条件下，通过摄取营养、合成自身成分，实现生长和增殖。细胞培养环境提供与体内相似的营养物质、生长因子、温度和pH等条件，模拟体内环境。细胞培养类型包括原代培养、传代培养和细胞系培养等。

包括基础培养基、血清、生长因子、抗生素等。培养基成分培养基配制培养基保存按照一定比例混合各成分，调整pH值，过滤除菌。配制好的培养基应分装、密封，在4℃冰箱中避光保存。030201细胞培养基的配制与保存

当细胞密度达到一定程度时，需要进行传代培养，以保持细胞活力。传代步骤包括消化、离心、重悬和接种等。细胞传代为了长期保存细胞，可以采用冻存技术。冻存步骤包括消化、离心、重悬于冻存液、程序降温和液氮保存等。细胞冻存将冻存的细胞取出，迅速解冻并接种到培养基中，使其恢复生长状态。复苏步骤包括取出细胞、快速解冻、接种和培养等。细胞复苏细胞传代、冻存与复苏技术

03细胞显微观察技术

利用可见光和光学透镜成像，观察细胞形态和结构。原理制备细胞样品、调节显微镜参数、观察并记录细胞形态和结构。步骤广泛应用于生物学、医学等领域，如细胞形态学、组织学、病理学等研究。应用普通光学显微镜观察

步骤制备荧光标记的细胞样品、调节荧光显微镜参数、观察并记录荧光信号。原理利用荧光物质在特定波长激发下发出荧光的特性，观察细胞内的特定成分或结构。应用用于研究细胞内蛋白质定位、基因表达、细胞信号传导等过程。荧光显微镜观察

03应用适用于研究细胞器的三维结构、细胞骨架动态变化、细胞膜蛋白分布等高级生物学问题。01原理利用激光束扫描样品并收集反射光或荧光信号，通过计算机重建三维图像，实现高分辨率、高对比度的细胞观察。02步骤制备细胞样品、调节激光共聚焦显微镜参数、进行三维图像重建和观察。激光共聚焦显微镜观察

04细胞组分分离与分析技术

利用不同细胞组分在密度和沉降系数上的差异，通过不同转速和时间的离心操作，实现细胞核、细胞质和细胞器的分离。差速离心法在离心管中预先加入密度梯度介质，使不同密度的细胞组分在离心过程中停留在不同位置，从而实现分离。密度梯度离心法利用特异性抗体与磁珠结合，通过磁场作用将目标细胞组分与磁珠一起分离出来。免疫磁珠分离法细胞核、细胞质和细胞器的分离

123利用质谱技术对蛋白质进行鉴定，包括蛋白质的相对分子质量、氨基酸序列等信息的确定。蛋白质鉴定通过蛋白质芯片、免疫共沉淀等技术研究蛋白质之间的相互作用，揭示细胞内的信号传导、代谢调控等过程。蛋白质相互作用研究研究蛋白质在翻译后的修饰过程，如磷酸化、糖基化等，以及这些修饰对蛋白质功能和细胞生物学行为的影响。蛋白质翻译后修饰研究蛋白质组学分析技术在细胞生物学中的应用

转录组测序和分析研究细胞内基因转录产物的种类、数量和变化规律，揭示基因表达调控机制和细胞生物学过程。基因编辑和细胞工程利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术对细胞基因组进行精确编辑，实现基因功能的研究和细胞工程的应用。基因组测序和分析利用高通量测序技术对基因组进行测序和分析，揭示基因组的组成、结构和功能，以及基因与性状之间的关系。基因组学和转录组学在细胞研究中的应用

05细胞功能检测技术

MTT法检测细胞增殖通过活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。DMSO能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。流式细胞术检测细胞凋亡利用流式细胞仪进行细胞凋亡检测，可以高速分析上万个细胞