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试验一植物组织培育试验报告

—试验目的

让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重分化为有构

造的组织和器官，最终形成完整的植株。

二试验原理

植物组织培育是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，够

连续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培育条件下，原来已经分化停顿生

长的细胞，又能重分裂，形成没有组织构造的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化

作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在确定条件下，又能重分化形成输导系统以及根和芽等组

织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸〔

IAA〕和6–苄基氨基腺嘌呤〔6–BA〕的比例，打算了根和芽的分化。

三试验器材

〔一〕试剂

乙醇、IAA或2，4–D、HgCl2〔或次氯酸钠〕、6-苄基氨基腺嘌呤〔6-BA〕

MS培育基

〔二〕仪器设备

培育室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶〔100mL〕，烧杯，量筒，培育皿，超

净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等

三试验步骤

1.配制培育基

〔1〕愈伤组织诱导培育基：MS培育基〔蔗糖含量为10g/L，2,4–D含量为2

mg/L，琼脂10g/L〕。

〔2〕试验培育基：在MS培育基中按表33–1参与IAA和6–BA。

吲哚乙酸先用少量0.1mol/LNaOH溶解，6-苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1mol/L

HCl溶解，然后用蒸馏水稀释，再参与培育基中。

2.培育基灭菌

将配好的培育基参与琼脂加热溶解，调至pH5.8，趁热分装于100mL三角烧瓶中，

每瓶约20mL。待培育基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后

在高压灭菌锅中121℃〔1kg/cm2〕下灭菌20min。取出三角烧瓶放在台子上，

冷却后备用。接种操作所需的一切用具〔如长镊子、解剖刀、剪刀等〕及灭菌水，需同时灭

菌。

3.诱导产生愈伤组织

〔1〕取强健的玫瑰、菊花茎数段，每段约5cm长，于烧杯中用0.1%氯化汞〔升汞〕

浸泡20min，取出用无菌水洗3～4次，置于无菌培育皿中，在接种箱中按无菌操作

要求剥去外皮〔接种箱事先用紫外灯灭菌30min〕，用解剖刀切成5mm厚的圆片〔弃

去开头一片和最终一片〕，用长镊子将它接种在诱导培育基上，留意圆片的切口朝向培育基，每

瓶接种4片，接种后扎好瓶口。

〔2〕将已接入植物组织〔外植体〕的三角烧瓶，培育在25℃温室中，每星期检查l～

2次，剔除材料已被杂菌污染的三角烧瓶，3～4周后产生愈伤组织。

〔3〕选取愈伤组织生长良好的三角烧瓶，用解剖刀将愈伤组织切下，转移到含有不同激

素的试验培育基中〔也可以连同原来的外植体一起转移〕，每瓶放1～2块，仍培育在

25℃温室中，每周1～2次观看不同处理的三角烧瓶中，愈伤组织分化状况，直至长出

根和芽。长成的幼小植株即为“试管苗”，可移栽于花盆中。

四试验结果

植物分生组织培育室指对植物体的分生组织进展离体培育。由于时间有限及试验严密

性等问题，大局部都失败了，但是照旧有小局局部化发育了出来。已经证明白植物组织能够经过

脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重分化为有构造的组织和器官，

最终形成完整的植株。

试验二三植物叶片与茎尖培育

—试验目的

离体叶培育是指包括幼叶片成熟叶片叶柄子叶叶鞘夜间组织叶原基等叶组织作为外植体的

无菌培育。由于叶片是植物进展光合作用的重要器官，又是某些植物的生殖器官，因此离体培

育在植物器官培育中占有重要地位。

二试验原理

很多植物的叶具有强大的再生力气能从叶片产生不定牙，在离体培育基中，水稻小麦油菜

番茄杨树菊花百合猕猴桃等百余种作物的叶组织已经再生并形成完整植株。离体叶培育是指包

括幼叶片成熟叶片叶柄子叶叶鞘夜间组织叶原基等叶组织作为外植体的无菌培育。

三试验材料

要选用易培育成功的叶组织，如幼叶比成熟叶易培育，子叶比叶片易培育，个体发育的早期幼

嫩叶