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第3章蛋白质分离纯化ppt

第三章蛋白质的分离纯化与表征

蛋白质的分离纯化与表征

•蛋白质的酸碱性质

•蛋白质分子的大小与形状

•蛋白质胶体与沉淀

•蛋白质分离纯化的一般原则

•蛋白质分离纯化的方法

•蛋白质含量测定与纯度鉴

1－蛋白质的酸碱性质

蛋白质的酸碱性质

•蛋白质中可解离的基团

•蛋白质的等电点

1－蛋白质的酸碱性质

蛋白质中可解离的基团

-COO-

-NH+pKa=3~3.2

3

pKa=7.6~8.4NextPage

1－蛋白质的酸碱性质

蛋白质中可解离的基团

--COO-

-COO

pKa=3.0~4.7pKa=4.4

1－蛋白质的酸碱性质

蛋白质中可解离的基团

-NH

pKa=5.6~7.02

pKa=9.4~10.6

1－蛋白质的酸碱性质

蛋白质中可解离的基团

pKa=9.8~10.4

pKa=9.1~10.8

pKa=11.6~12.6

1－蛋白质的酸碱性质

蛋白质的等电点

蛋白质等电点蛋白质等电点

胃蛋白酶1.0-胰凝乳蛋白酶8.3

卵清蛋白4.6-胰凝乳蛋白酶原9.1

血清清蛋白4.7核糖核酸酶9.5

-乳球蛋白5.2细胞色素C10.7

胰岛素5.3溶菌酶11.0

血红蛋白6.7

2－蛋白质的分子形状与大小

蛋白质分子的大小与形状

•根据化学组成测相对分子量

•渗透压法测相对分子量

•扩散系数法测相对分子量

•沉降分析法测相对分子量

•凝胶过滤法测相对分子量

•SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测相对分子量

2－蛋白质的分子形状与大小

沉降分析法测相对分子量

斯维得贝格方程：

RTs

Mr=

D(1-)

-1