色谱定性定量.pptx

三、色谱定性与定量方法;人参药材的HPLC图谱;人参皂苷标准品的HPLC色谱图;丙二酰基人参皂苷Rb1;面积归一：Rg1=1.0%,Rb1=3.5%

外标法：Rg1=0.2%,Rb1=0.5%;（1） 色谱定性分析;纯物质对照定性;用相对保留值定性

用已知物增加峰高法定性; 应用范围：适用于简单混合物，对该样品已有了解并具有纯物质的情况。

优点：应用简便，不需要其他仪器。

缺点：定性结果的可信度不高。

提高可信度的方法：双柱、双体系定性;文献值对照定性分析（GC）;与其它仪器或化学方法联合定

性

离线联用方式

在线联用方式;离线联用方式;在线联用方式;GC-MS;（2）色谱定量分析;■定量要解决的问题

峰面积的测量和计算

校正因子的测量与计算

色谱定量方法及其应用;峰面积的测量与计算

积分仪

色谱工作站

简便、速度快，精度高，可达0.2-2%，对小峰及不对称峰的结果准确，是色谱发展趋势。;重叠峰的测量

切线分峰;连线分峰;校正因子的测量与计算

相对校正因子

由于绝对校正因子与仪器的灵敏度有关，又由于灵敏度与实验条件相关，且每一检测器的灵敏度都是不同的，它不容易测量准确，亦无通用性，所以实际工作中使用相对校正因子。;相对校正因子的表达式;相对校正因子的测量

理论上相对校正因子与试样、标准物质、检测器类型、载气类型有关，与其它色谱条件无关。

无纯物质时或对结果准确度要求不高时，相对校正因子可通过查表得。

即无纯物，手册上又无数据时，可用一些计算方法估算这些物质的相对校正因子。;定量方法

校正归一化法——含归一化

内标法——含内标标准曲线法

外标法——含单点校正;校正归一化法

推导：;应用范围：当试样中各组分都能流出色谱柱，且在检测器上均有响应，各组分峰没有重叠时，可用此法。;归一化法;内标法

推导

将一定量的纯物质作为内标物，加入到准确称量的试样中。;适用范围：当只需测定试样中某几个组分，且试样中所有组分不能全部出峰时可用。

优点：受操作条件的影响较小，定量结果较准确，使用上不象归一化法那样受到限制，此法适合于微量物质的分析。;内标标准曲线法;外标法（标准曲线法）

用于常规分析

优点：操作简单，计算方便。

缺点：结果的准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。该法必须定量进样。;单点校正;定量中的误差问题

样品的代表性（样品的前处理）

进样系统的影响

柱系统的影响

测量误差

定量结果的误差分析