高效液相色谱法测定苯甲酸的不确定度分析报告.docVIP

济宁耐特食品有限公司品管部实验室 测量不确定度评定报告 PAGE PAGE 2 - 食品（金标特级生抽）中苯甲酸含量测量不确定度评定报告 报告编号：NT-BQ-2010-02 编 制： 日 期： 年 月 日 批 准： 日 期： 年 月 日 济宁耐特食品有限公司品管部实验室 PAGE 5 食品（金标特级生抽）中苯甲酸含量测定 测量不确定度评定报告 一．概述 1．样品编号：100771；环境条件：温度20℃； 2．检测仪器设备： 2.1 高效液相色谱仪Waters e2695，设备编号SB-05-082，定量重复性0.7%； 2.2分析天平XS105，设备编号SB-05-087，精细量程0~41g，最小分度值0.00001g，0~50g示值误差为±0.00001g； 2.3 A级刻度吸管，1mL，允差为±0.007m 2.4 A级容量瓶，100 mL，允差为±0.1mL 2.5 A级容量瓶，50mL，允差为±0.05m 3．检测试剂： 3.1 苯甲酸标准品：购自中国药品生物制品检定所； 3.2乙酸铵（分析纯）、色谱级甲醇、超纯水。 4．检测依据：GB/T5009.29-2003《食品中山梨酸、苯甲酸的测定》 5．检测人员：相丽新 6．检测时间：20 二、检测原理 依据GB/T5009.29-2003，样品经前处理后，进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 三、测量步骤 3.1苯甲酸标准使用液的配制 3.1.1 将苯甲酸标准品从冰箱中取出放置到室温，准确称取50.0mg，置于100mL容量瓶中，用色谱甲醇溶解并定容，摇匀，冷藏于冰箱，作为标准品贮备液。 3.1.2 10ug/mL苯甲酸标准使用液 将苯甲酸标准贮备液从冰箱中取出放置至室温，准确吸取1.00mL，至50mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液定容，混匀后备用。 3.2样品前处理 移取1mL金标特级生抽酱油于去皮烧杯中准确称量，先后加入超纯水，2%氢氧化钠溶液、10%硫酸铜溶液5mL，絮凝沉淀去除蛋白等杂质后，用超纯水定容至50mL，摇匀，取适量样品于10000r/min的条件下高速离心3min，上清液经0.45um滤膜过滤后，作为待检测样品，同时做空白对照。 3.3试样测定 按Waters高效液相色谱操作规程规定的程序开机平衡系统，待基线稳定后，取制备好的待测样品液进样分析，记录色谱图，用面积百分比法计算检测结果。 4数学模型 试样中苯甲酸含量计算公式如下： X1= 式中：X1样品中苯甲酸含量，单位为克每千克（g/kg)； A样品液中苯甲酸峰面积； AS标准使用液中苯甲酸峰面积； CS标准使用液浓度，单位微克每毫升（μg/mL) V样品最终定容体积，单位为毫升（mL） m样品质量，单位为克（g） 5测量不定度来源 5.1称取样品质量产生的不确定度um； 5.2试样前处理定容时引起的不确定度uv； 5.3标准溶液配制引起的不确定度uCs； 5. 5.3.2 分度吸管移液 5.4平行试验重复性产生的不确定度u0； 5.5 测量时由Waters高效液相色谱仪产生的不确定度u1； 6不确定度传播律 采用相对标准不确定度合成公式计算： 7 测量结果及标准差 对配制好的10ug/mL的苯甲酸标准品进行了六次重复测量，其测量结果及标准偏差如表7-1： 表7-1 苯甲酸标准品峰面积六次重复测量结果 序号 样品浓度（ug/mL） 保留时间（min) 峰面积 （伏.秒） 1 10 3.947 243852 2 3.941 268841 3 3.935 270604 4 3.938 268756 5 3.935 270675 6 3.934 268330 平均值 3.938 265176 标准偏差 0.005 10493.91 在重复性条件下，对金标特级生抽样品进行八次测量，八次测量数据如表7-2： 表7-2 八次平行测量结