病毒与寄主的相互作用改.pptVIP

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烈性噬菌体 感染后短时间内能连续完成繁殖过程而使宿主细胞裂解的噬菌体。比如T噬菌体系列(T1-T7) 。 噬菌体与细菌的相互作用 本文档共37页;当前第1页;编辑于星期三\6点37分 烈性噬菌体——T4噬菌体 典型的蝌蚪状外形:六角形的头部和可收缩的长的尾部; 头部的蛋白质外壳内含有折叠的DNA分子; 头部大小为9060纳米(nm),尾部10020纳米。 是研究最广泛和深入的细菌噬菌体,侵染大肠杆菌B菌株。 本文档共37页;当前第2页;编辑于星期三\6点37分 繁殖过程(烈性噬菌体): 本文档共37页;当前第3页;编辑于星期三\6点37分 吸附:最初的吸附是随机的,当噬菌体以尾丝作为吸附点,通过尾部的刺突与细菌的表面的特殊受体相结合后,则具有特异性 侵入: 噬菌体通过收缩尾鞘,将核酸物质注入寄主细胞内 噬菌体的复制 烈性噬菌体的复制过程包括核酸的复制、蛋白质壳体(头部、尾部和尾丝)和释放噬菌体所需要的酶,该过程是一个非常复杂的过程 噬菌体的复制: 本文档共37页;当前第4页;编辑于星期三\6点37分 增殖过程的3阶段转录: 大 本文档共37页;当前第5页;编辑于星期三\6点37分 本文档共37页;当前第6页;编辑于星期三\6点37分 装配、释放 噬菌体的各个部分有序地组装在一起,形成完整的病毒粒子,成熟的病毒粒子引起寄主细胞的裂解,释放处病毒粒子 本文档共37页;当前第7页;编辑于星期三\6点37分 本文档共37页;当前第8页;编辑于星期三\6点37分 烈性噬菌体感染细菌的结果: 液体培养基:浑浊菌液变清亮 双层(上层含菌)固体平板:出现噬菌斑 一步生长曲线(Debruck,1939) 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线,用于反映各种噬菌体潜伏期、裂解期和裂解量的特征曲线。 本文档共37页;当前第9页;编辑于星期三\6点37分 裂解期: 平稳期: 效价最高期 裂解量: 每个受染细胞产生的噬菌体的总数。 (平稳期pfu/ 受染细胞?) 潜伏期:(侵入到装配): 隐悔期;胞内累计期 本文档共37页;当前第10页;编辑于星期三\6点37分 温和噬菌体 感染后其基因组整合到宿主的基因组上,并随宿主基因组的复制而同步,而不引起宿主细胞的裂解。比如P1和λ噬菌体 。 温和噬菌体 溶原菌:受温和噬菌体感染的宿主称之为溶原菌。 前噬菌体:整合在宿主基因组上的温和噬菌体的核酸。 本文档共37页;当前第11页;编辑于星期三\6点37分 线形dsDNA,分子为48.5kb; 编码61个基因,其中38个较为重要; 生活史可分为裂解周期和溶原周期; 为中等大小的温和噬菌体; 温和噬菌体——λ噬菌体 溶源原因 ----合成阻遏蛋白(CI蛋白 ),阻遏某些基因的转录; -----关闭某些噬菌体蛋白基因(晚期蛋白)的表达 ----整合酶的合成(int基因编码) 整合位点 λ噬菌体的整合位点尽限于gal及bio等少数几个基因内。 本文档共37页;当前第12页;编辑于星期三\6点37分 λ噬菌体整合过程 本文档共37页;当前第13页;编辑于星期三\6点37分 温和性噬菌体的去向: 自发裂解:机率较小,10-5 诱发裂解:用物理、化学因素处理,诱导原噬菌体复制,导致寄主细胞裂解 多数情况:噬菌体进入寄主细胞后,将其核酸整合到寄主的染色体上,或游离在寄主的细胞质中,并随着寄主细胞的生长繁殖而传下去,宿主细胞不裂解 少数情况:原噬菌体进行复制,装配成为成熟噬菌体,使寄主裂解 裂解方式: 本文档共37页;当前第14页;编辑于星期三\6点37分 λ噬菌体感染结果 本文档共37页;当前第15页;编辑于星期三\6点37分 溶原细菌的特点: 可以自发的消除噬菌体DNA,但不能自发产生; 2. 温和噬菌体可以自发或人工诱发变为毒性噬菌体; 3. 溶原细菌可失去噬菌体的核酸后复愈; 4. 溶原细菌对同源噬菌体的感染具有免疫性; 5. 某些溶原细菌可以合成特殊的代谢产物,如白喉杆菌只有在被β –噬菌体感染形成溶原细菌后才能产生白喉毒素; 6.温和噬菌体有λ 噬菌体与P1噬菌体等。它们都可以感染宿主细胞后形成溶原细菌,两者区别在于: λ 噬菌体DNA通常整合到宿主染色体上; P1噬菌体感染宿主后主在游离在细胞质中。 本文档共37页;当前第16页;编辑于星期三\6点37分 λ噬菌体在基因工程中的利用 λ噬菌体基因有一半左右基因为非必需基因;当它们被外源基因取代之后,不影响噬菌体的生命周期。由外源基因取代非必需基因所形成的重组噬菌体DNA,可以随寄主细胞一起被复制和增殖。 常用的λ噬菌体载体类型 插入型载体; 免疫功能失活插入型载体; β-半乳糖苷酶失活插入型载体。 替换型载体; 柯斯质粒载体。 本文档共37页;

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