生物安全柜的正确使用和维护演示文稿.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 一）II级生物安全柜内的准备工作 在开始工作之前，准备一张特别的活动所需的材料检查清单，在生物安全柜内的放置必要的材料。因为安全柜的气幕防护屏障是很脆弱的，做好充分的准备是为了在正式工作时减少手臂穿越气幕的运动次数。 操作者手臂横向快速地进出安全柜会干扰气幕，并损害安全柜所提供的局部防护屏障。手臂垂直于安全柜的操作口，进出时缓慢的移动，将减少这种危险。 房间其他人员的活动（例如，迅速运动，开、关房间门等）也同样可以干扰安全柜的空气保护屏障。 本文档共91页；当前第62页；编辑于星期二\3点19分 在开始工作之前，操作者应该调整凳子高度，使自己的脸在前操作口之上。 在手臂放进安全柜内大约一分钟之后，才能进行实验操作。这样可以使安全柜稳定，并且能让气流“清扫”掉手和臂表面的微生物污染物。 当操作者的胳膊横放在前面的格栅上的时候，房间空气可能直接流动到安全柜的工作区域，而不是通过前面的格栅进风。轻微地提高胳膊会缓和这个问题。 前面的格栅绝对不能让研究记录、废弃的塑料包装和吸液装置等阻挡。 所有的操作应该在距离前面的格栅4英寸里面的工作面上进行。 本文档共91页；当前第63页；编辑于星期二\3点19分 二）工作前的净化 在开始工作之前要让安全柜的风机至少运行3-5分钟使安全柜内的空气进行净化。 安全柜的工作台面、内壁（不包括送风滤器扩散板）和观察窗的内表面用消毒剂擦拭。 再用无菌蒸馏水进行擦拭以清除残余的消毒剂。 放到安全柜的容器和材料的表面应该以70%的乙醇擦拭，以减少将环境的杂菌带到安全柜内。 定期的对孵箱和冰箱进行消毒 本文档共91页；当前第64页；编辑于星期二\3点19分 三）生物安全柜内部材料的放置 在安全柜的工作台面上可以放一块塑料衬底的能吸水的毛巾。 所有的材料应该放在离安全柜前面的格栅和后面工作台面的边缘尽可能远的位置（图11）。 容易产生气溶胶的设备（例如，旋转搅拌器，台式离心机）应该靠近安全柜的后部放置。 操作时的动作应该从工作台面的清洁区到污染区。 本文档共91页；当前第65页；编辑于星期二\3点19分 本文档共91页；当前第66页；编辑于星期二\3点19分 安全柜内材料的放置 洁净培养物（左边）可以进行接种（中心）；用过的污染吸管放在浅的平底盘里，而其它污染的材料可以放在生物危害包（右边）中。这安排对于习惯于左手操作的人要颠倒过来。 洁净 污染 本文档共91页；当前第67页；编辑于星期二\3点19分 四）II级生物安全柜内的操作 在生物安全柜内所进行的许多普通过程可能产生喷溅或气溶胶。应该始终采用良好的微生物学技术，减少喷溅和气溶胶产生。 II级生物安全柜的设计可以使水平方向喷出的孢子在14英寸的传播距离以内被安全柜向下流动的气流所俘获。 因此，保持干净的材料离开产生气溶胶的活动至少1英尺以外将会减少交叉污染的可能性。 本文档共91页；当前第68页；编辑于星期二\3点19分 本文档共91页；当前第69页；编辑于星期二\3点19分 本文档共91页；当前第70页；编辑于星期二\3点19分 本文档共91页；当前第71页；编辑于星期二\3点19分 五）消毒 表面消毒 工作完成时，所有的容器和设备应该进行表面消毒并拿出安全柜。在每天工作结束时，应该对安全柜进行最后的表面消毒，包括工作台面、安全柜的边壁、后壁和观察窗玻璃内部的擦拭。如果必要，安全柜也应该进行放射性检测并进行必要的消毒。 作为安全的微生物学操作的最后步骤，操作者应该摘下手套、脱下工作服并且洗手。 本文档共91页；当前第72页；编辑于星期二\3点19分 本文档共91页；当前第73页；编辑于星期二\3点19分 六）发生少量的喷洒时的消毒 在生物安全柜内发生少量的喷洒时，应该用污染清除吸收纸巾立即进行处理，并将使用过的纸巾放到这个生物危害包里。 对安全柜内的所有物品和安全柜内部，用浸满消毒液的毛巾立即进行擦洗。 本文档共91页；当前第74页；编辑于星期二\3点19分 本文档共91页；当前第75页；编辑于星期二\3点19分 七）发生大量的溢出 当发生大量的溢出时，液体会通过前面或后部的格栅流到下面去，这时要求更广泛的消毒。安全柜内的所有的物品应该进行表面消毒并拿出安全柜。 应该使消毒液维持20-30分钟的适当接触时间 如果溢出的液体含有放射性材料，可采取类似的程序。并应该与辐射安全人员联系，寻求特殊的指导。 本文档共91页；当前第76页；编辑于星期二\3点19分 八）气体消毒 在更换HEPA过滤器或进行内部