糖的核磁共振性质.pptVIP

端基质子和甲基质子的信号与其它信号相隔较远易于辨认，可以推测糖的个数、糖的种类及连接位置 偶合常数 质子的邻位偶合常数(J)与两面角(θ)有关 在吡喃环中当相邻的两个质子均是竖键时，其两面角为180°，偶合常数为6~8Hz；一个竖键一个横键时，其两面角为60°，偶合常数为2~4Hz。 对于葡萄糖或半乳糖，β-D苷的J为6~8Hz；α-D苷的J为2~4Hz。 甘露糖和鼠李糖相邻两个质子的两面角都约在60? 左右，J值差别不大，不足以区分苷键的构型。 对于呋喃糖，无论其端基质子和C2位质子是处于顺式还是反式，其J值均变化不大（都在0~5），故也不能判断其苷键构型。 通常，α-苷键端基质子信号的化学位移 > 5.0ppm; β-苷键端基质子信号的化学位移 < 5.0ppm. 1、多糖是高分子化合物，其纯度与小分子化合物的标准判断不同。即使是一种多糖纯品，其微观也不均一。 2、多糖纯品实质上是一定分子量范围的均一组分。 3、多糖纯度常用的测定方法 （三）单糖的鉴定 概述：在中草药成分分离工作中，或在苷和多糖的水解产物中，常常会得到一些单糖成分，须要加以证明。目前发现新单糖须要进行结构决定的机会较少，多数工作为进行糖的印证。 糖的水溶性很大，且不易获得结晶，有些物理常数不易测定，给印证工作带来困难，以往用化学方法制成衍生物，再作分离鉴定，手续繁复。现多采用各种色谱技术，对糖类进行鉴定。 近年来不依赖样品挥发的质谱技术如场解析质谱（FD-MS）和快原子轰击质谱（FAB-MS）在苷的结构测定中得到广泛的应用。FD-MS 和FAB-MS均可给出准分子离子峰[M+H]+、[M+K]+、[M+Na]+、[M-H]-和一系列失去糖的碎片峰[M-162+H]+（162表示失去糖的质量为162+H2O=180）、[M-162-146+H]+、[M-H-146]-等等。FD-MS给出高质量区信息较丰富，但苷元部分的结构碎片信息较少，FAB-MS 则在低质量区还给出苷元的结构碎片，因而应用越来越普遍 糖连接位置确定还可采用NOE实验，选择性照射糖的端基质子可观察到与糖连接位置的碳上质子的增益。HMBC也被广泛用于苷中糖的连接位置的确定，在HMBC谱中糖的端基氢与连接位置的碳有明显的相关点。全相关谱TOCSY对于糖环的连续相互偶合氢的归属特别有用，当糖的数目较多时，糖上氢信号严重重叠，往往可以通过任何一个分离较好的信号，得到所有该信号偶合体系中的其他质子信号，进行归属 HMBC谱，即1H检测的异核多键相关实验，该项技术采用较小的2JCH或3JCH偶合，解决了分子中隔碳相连的问题，可以观测到质子与相隔而2-3个或更多个化学键的碳原子；因此它可以连接结构单元；组装结构片断，从而确定化合物的分子骨架。在皂苷中可以确定糖的连接顺序和位置 ⑵. 酶催化水解方法 例如：麦芽糖酶只能水解α-苷键； 苦杏仁酶只能水解β-苷键等。 第七节 糖及苷的提取分离 一、提取 1、破坏或抑制酶的活性 ① 植物体内存在着多糖和苷，也存在着能水解该多糖和苷的酶（酶与多糖和苷共生！），但两者存在于不同的植物组织中。为了获得原存在于植物体中的原生苷，必须采用适当的方法破坏或抑制酶的活性。 ② 破坏或抑制酶活性的常用方法 A、以晒干或晾干的方法迅速干燥植物药材； B、提取时用沸水、甲醇、60%以上的乙醇等溶剂； C、在中药材中加入一定量的碳酸钙拌匀后再用沸水提取。 2、单糖、低聚糖及其苷类化合物的提取过程 以水或稀醇为提取溶剂； 回收提取溶剂得到中药材的提取物； 石油醚萃取提取物，得到油脂类物质（极性小的化合物）； 氯仿或乙醚萃取提取物，得到苷元； 乙酸乙酯萃取提取物，得到单糖苷； 正丁醇萃取提取物，得到低聚糖苷； 3、多糖及其苷类化合物的提取过程 ① 用甲醇或1：1乙醇/乙醚混合液将植物药材脱脂（包括脱色素）； ②水加热提取2-3次，每次4-6小时（得水提部分-多糖、黏液质、树胶、木聚糖、糖原等溶解于热水） ※ 多糖随着聚合度的增加，性质与单糖相差越来越大，一般是非晶形，无甜味，难溶于冷水，溶于热水成胶体溶液。 ③0.5mol/LnaOH水溶液提取2次（得碱溶部分-酸性多糖、半纤维素可溶解于稀碱） ※ 碱性多糖如氨基糖可溶于稀酸，纤维素在各种溶剂中均不溶解。为