植物细胞周期观察及染色体制备实验报告.doc

实验流程1. 根尖培养：将大蒜或洋葱瓣放在盛有清水的培养皿（烧杯）中，让根部接触水，在 实验流程 1. 根尖培养：将大蒜或洋葱瓣放在盛有清水的培养皿（烧杯）中，让根部接触水，在20～25℃光照下培养，待根尖长到1 ～ 2cm时，剪下备用。剪取根尖的时间以上午9时左右为好。 2. 预处理：将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶液中室温下处理3 ～ 4h。以未作预处理为对照。 3. 固定：将经过预处理和未经预处理的材料冲洗后转移至卡诺氏固定液中，室温下处理24h。水洗放入70%乙醇中保存。 4. 解离：将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl中，60℃下处理8-10min（可视具体情况而定）。 5. 软化：将解离好的根尖冲洗后，放入45%醋酸中软化10min左右。 6. 染色：切取1~2mm的分生区，用改良苯酚品红染液染色10-20min。 7. 压片：盖上盖玻片，在酒精灯上烤片。然后固定盖玻片，用铅笔垂直、用力敲击盖片几下，将材料压成一层细胞。 8. 镜检：先在低倍镜下找到细胞，再换成高倍镜仔细观察有丝分裂过程中染色体的行为。 9. 拍照：在高倍镜下仔细观察有丝分裂过程中染色体的行为的同时，选择适宜的图像拍照。 实验课名称 遗传学实验 实验名称 植物细胞周期观察及染色体制备 成绩______________ 实验原理及目的实验目的 1、以细胞形态和染色体的动态变化为主线，熟悉并识别细胞的有丝分裂各时期的特点；2、了解进行体细胞染色体研究对材料的时空性选择要求的原因；3、通过观察思考理解有丝分裂在细胞数量增加中遗传物质传递的重要性；4、掌握植物染色体制片技术。实验原理? 植物生长旺盛的分生组织（如根尖、茎尖、幼叶等）都在进行着有丝分裂。取这些组织为材料，经过固定后迅速杀死细胞，并使细胞内的物质和生活状态得以保持，再经过解离、染色、压片等过程，在显微镜下就可以看到大量处于有丝分裂各个时期的细胞，并进行染色体行为的观察。? 有丝分裂中期的染色体具有典型的形态特征，并容易计数。为了获得更多的中期染色体装片，可以采用常用的药物处理方法，阻止纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期，便于进行观察。实验材料、仪器及试剂材料洋葱、大蒜的鳞茎，玉米、蚕豆的种子等。本实验选用大蒜。器皿及仪器光学显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。试剂卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品红染液等。实验步骤实验流程图姓名 实验原理及目的 实验目的 1、以细胞形态和染色体的动态变化为主线，熟悉并识别细胞的有丝分裂各时期的特点； 2、了解进行体细胞染色体研究对材料的时空性选择要求的原因； 3、通过观察思考理解有丝分裂在细胞数量增加中遗传物质传递的重要性； 4、掌握植物染色体制片技术。 实验原理 ? 植物生长旺盛的分生组织（如根尖、茎尖、幼叶等）都在进行着有丝分裂。取这些组织为材料，经过固定后迅速杀死细胞，并使细胞内的物质和生活状态得以保持，再经过解离、染色、压片等过程，在显微镜下就可以看到大量处于有丝分裂各个时期的细胞，并进行染色体行为的观察。 ? 有丝分裂中期的染色体具有典型的形态特征，并容易计数。为了获得更多的中期染色体装片，可以采用常用的药物处理方法，阻止纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期，便于进行观察。 实验材料、仪器及试剂 材料 洋葱、大蒜的鳞茎，玉米、蚕豆的种子等。本实验选用大蒜。 器皿及仪器 光学显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。 试剂 卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品红染液等。 实验步骤 实验流程图 解离材料培养镜检染色软化固定保存预处理 解离 材料培养 镜检 染色 软化 固定 保存 预处理 实验结果 实验结果 (a) (b) (c) (d) (e) 图1 大蒜根尖分生区细胞周期观察(400×) 分析讨论 说明制备染色体各步的作用是什么? 预处理的目的？还有其他方法吗？ 秋水仙素能够抑制有丝分裂，使染色体停留在分裂中期，在这种分裂过程中，染色体纵裂，但细胞不分裂，因此可以使染色体数目加倍。此外，秋水仙素还能使染色单体缩短、分开，使染色体呈现明显而利于辨认。 固定的作用？固定剂的组成？对固定剂配制的要求？ 固定的作用：迅速防止细胞死亡后的变化，如自溶、腐败等，尽量保持生长状态结构；防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。 固定剂的组成：95%的乙醇：醋酸=1:1 要求：现配现用 解离的目的？如何判断解离的效果？其他的解离方法？ 解离的目的