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酶学与酶工程复习资料 上一届考试试题 一、名字说明 1、酶的活性中性：酶分子中干脆与底物结合，并和酶催化作用干脆有关的区域叫酶的活性中心， 参加构成酶的活性中心和维持酶的特定构象所必需的基团为酶的必需基团。 2、米式方程与各字母的意义：米氏方程表示一个酶促反应的起始速度v与底物浓度S关系的速 度方程，V=VmaxS/ （Km + S）。其中Km值称为米氏常数，Vmax是酶被底物饱和时的反应速度，⑶ 为底物浓度。由此可见小值的物理意义为反应速度（V）达到l/2Vmax时的底物浓度（即Km=[S]）, 单位一般为mol/L,只由酶的性质确定，而与酶的浓度无关。 3、别构效应：一个蛋白质与其配体（或其他蛋白质）结合后，蛋白质的空间结构发生变更，使 它适用于功能的须要，这一类变更称为别构效应或变构效应。 4、遗传密码：遗传密码确定蛋白质中氨基酸依次的核昔酸依次，由3个连续的核昔酸组成的 密码子所构成。 5、盐析：增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低的现象。是蛋白质分别纯化 中常常运用的方法，最常用的中性盐有硫酸镂、硫酸钠和氯化钠等。 6、内囊性包埋法：系利用自然的或合成的高分子材料（统称为囊材）作为囊膜壁壳，将固态或 液态药物包袱成为的药库型微型胶囊。 7、固定化酶：水溶性酶经物理或化学方法处理后，成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的 衍生物。在催化反应中以固相状态作用于底物。 8、必需水：维持酶分子完整的空间构象所必需的最低水量。 二、问答题 1、温度对酶促反应的影响与缘由。 答：温度对酶促反应的影响包括两方面：一方面是当温度上升时，反应速度也加快，这与一 般化学反应相同。另一方面，随温度上升而使酶逐步变性，即通过削减有活性的酶而降低酶的 反应速度。在低于最适温度时，前一种效应为主，在高于最适温度时，则后一种效应为主，因 而酶活性丢失，反应速度下降。 2、操纵子的定义与组成。 答：操纵子：指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称，基因表达的协同 单位，转录的功能单位。很多功能上相关的基因前后相连成串，由一个共同的限制区进行转录 的限制，包括结构基因以与调整基因的整个DNA序列。操纵子通常由2个以上的编码序列与启 动序列、操纵序列以与其他调整序列在基因组中成簇串联组成。 3、蛋白质合成过程当中的主要物质。 答：主要为mRNA、tRNA、氨基酸、核糖核蛋白体以与有关的酶和协助因子。蛋白质合成是 以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA、酶和协助因子的作用，合成多 肽链的过程。 4、酶生物合成模式有哪几种与其特点?简述其接近志向模式的方法？ 答：1、同步合成型：酶的生物合成与细胞生长同步进行的一种酶生物合成模式。该类型酶 的 生物合成速度与细胞生长速度紧密联系，又称为生长偶联型。2、持续合成型：酶的生物合成 在细胞的生长阶段起先，在细胞生进步入平衡期后，酶还可以持续合成一段较长时间。3、中期 合成型：酶在细胞生长一段时间以后才起先，而在细胞生进步入平衡期以后，酶的生物合成也 随着停止。4、滞后合成型：酶是在细胞生长一段时间或者进入平衡期以后才起先其生物合成并 大量积累，又称为非生长偶联型，很多水解酶的生物合成都属于这一类型。 在酶的发酵生产中，为了提高产酶率和缩短发酵周期，最志向的合成模式应是持续合成 型。属于持续合成型的酶，在发酵过程中没有生长期和产酶期的明显差别。细胞一起先生长就 有酶产生，直至细胞生进步入平衡期以后，酶还可以接着合成一段较长的时间。对于其他合成 模式的酶，可以通过基因工程细胞工程等先进技术，选育得到优良的菌株，并通过工艺条件的优 化限制，使他们的生物合成模式更加接近于持续合成型。其中对于同步合成型的酶，要尽量提高 其对应的mRNA的稳定性，为此适当降低发酵温度是可取的措施；对于滞后合成型的酶，要设 法降低培育基中阻遏物的浓度，尽量削减甚至解除产物阻遏或分解代谢物阻遏作用，使酶的生 物合成提早起先；而对于中期合成型的酶，则要在提高mRNA的稳定性以与解除阻遏两方面考 虑，使其生物合成的起先时间提前，并尽量延迟其生物合成停止的时间。 5、举例说明生物酶制剂生产工艺流程。 答：一、植物细胞培育的工艺流程：外植体一细胞的获得-细胞培育一分别纯化—产物。植 物细胞培育产酶的工艺过程——大蒜细胞培育生产超氧化物歧化酶（SOD） ： 1、大蒜愈伤组织 的诱导：打破休眠的大蒜蒜瓣，去除外皮消毒在无菌条件下，将蒜瓣切成0.5cm3左右的小块, 植入培育基中，25C。、600luxs 12h/d光照的条件下培育18d,诱导得到愈伤组织。2、大蒜细 胞悬浮培育：愈伤组织在无菌条件下转入培育基中，加入灭菌玻璃珠，25C。、600lux. 12h/d的 光照条件下震荡培育10?12d,使愈伤组织