DB36T 1800-2023灵芝菌种生产技术规程.docx

ICS 65.020.20 CCS B 30 江 DB36 西 省 地 方 标 准 DB36/T 1800—2023 灵芝菌种生产技术规程 Technical regulations for spawn production of Ganoderma lingzhi 2023 - 07 - 01 发布 2024 - 01 - 01 实施 江 西 省 市场监 督 管理局 发 布 I DB36/T 1800—2023 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 场地环境 2 5 设施设备 2 6 生产技术 2 7 菌种生产档案 4 II DB36/T 1800—2023 前 言 本文件按照GB/T 1. 1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由江西省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：江西省农业科学院农业应用微生物研究所。 本文件主要起草人：胡佳、魏云辉、戴丹、彭新红、孙鹏。 1 DB36/T 1800—2023 灵芝菌种生产技术规程 1 范围 本文件规定了灵芝菌种生产的场地环境、设施设备、生产技术、菌种生产档案。 本文件适用于工厂化生产企业或专业合作社生产灵芝母种、原种和栽培种。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 GB/T 12728 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 3 术语和定义 GB/T 12728中确定的术语和定义适用于本文件。 3.1 灵芝 Ganoderma lingzhi 灵芝俗称赤芝、红芝、灵芝草等，是我国传统的名贵中药材，隶属于担子菌门（Basidiomycota）、 蘑菇纲（Agaricomycetes）、多孔菌目（Polyporales）、灵芝科（Ganodermataceae）、灵芝属（Ganoderma）。 3.2 菌种 spawn 生长在适宜基质上具有结实性的菌丝纯培养物。包括母种（ 一级种）、原种（二级种）和栽培种 （三级种）。 3.3 母种 stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，也称为一级种。 3.4 原种 mother spawn 2 DB36/T 1800—2023 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，也称为二级种。 3.5 栽培种 planting spawn 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖菌种，也 称为三级种。 4 场地环境 4.1 生产场地选择 选择地势平坦、排灌方便、土壤肥沃、通风良好的场所。要求周边环境清洁，无污染源。生产场地 应符合NY/T 528的规定。 4.2 生产用水 生产用水应符合GB 5749的规定。 5 设施设备 5.1 基本设施 具备配料室、装袋室、灭菌室、接种室、培养室、贮藏室等设施。 5.2 基本设备 粉碎机、磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、操作台、超净工作台或接种箱、空调、除湿机、 培养架、恒温培养箱、冰箱、显微镜等。生产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装袋机。 6 生产技术 6.1 母种生产 6.1.1 PDA 培养基 称取200g马铃薯切成小块加1000mL水煮沸20min～30min，纱布过滤取滤液定容至1000mL，加入20g 葡萄糖和15g～20g琼脂粉，pH自然。 6.1.2 分装和灭菌 将配制好的PDA培养基分装至18mm×180mm或20mm×200mm玻璃试管的1/3处。试管口应保持干 净，分装后塞入棉塞或硅胶塞，并用牛皮纸包扎。包扎好的直立放在高压灭菌锅内高压蒸汽灭菌，121℃ 保持30min。 6.1.3 制作斜面 灭菌后的试管冷却至60℃左右，将试管倾斜摆放在操作台桌面上，试管口比试管底部高1.0cm~ 1.5cm ，做成培养基斜面，斜面长度约为试管长度的2/3。 3 DB36/T 1800—2023 6.1.4 无菌检测 随机抽取3%～5%的试管斜面（每批抽样量不得少于10支） ，在30℃±2℃下培养2d ，检查有无微 生物菌落，无菌落的为合格。 6.1.5 接种 超净工作台或接种箱在接种前用紫