分光光度法和高效液相色谱法测定啤酒中残留烷基苯磺酸钠.docxVIP

分光光度法和高效液相色谱法测定啤酒中残留烷基苯磺酸钠 1 啤酒工业清洗 清洁是啤酒生产的一项基本工作。清洗的目的是要尽可能地去除生产过程中管道及设备和包装物内壁生成的污物,消除杂质及微生物对啤酒质量的威胁,其中回收啤酒瓶必须只只清洗。糖化、发酵、过滤、灌装基本生产环节的设备必须有高效合理的清洗消毒手段,包括原位清洗(cleaning in place,CIP)、移位清洗(clean out of place,COP)、洗瓶工艺等。啤酒工业清洗剂可以分为碱性清洗剂和酸性清洗剂2种。碱性清洗剂大多是在6 0%～80%的NaOH基础上添加苏打、硅酸盐、磷酸盐、螯合剂及表面活性剂等构成,酸性清洗剂则主要是由磷酸、硫酸、硝酸或柠檬酸添加表面活性剂等构成 清洗剂中普遍使用的直链烷基苯磺酸钠带入啤酒中除了对啤酒泡沫产生影响 LAS为全世界普遍使用的表面活性剂,因此广泛存在于环境中,甚至在南极麦克斯韦尔海湾海域水体中都能检出 本研究分别采用分光光度法和高效液相色谱法测定啤酒中残留直链烷基苯磺酸钠,旨在寻找针对啤酒中残留直链烷基苯磺酸钠检测适用、快速、准确的常规检测方法,为食品中直链烷基苯磺酸钠残留的检测提供参考。 2 材料和方法 2.1 材料和机器 2.1.1 试剂及标准试剂 瓶装啤酒共6种,依次为1～6号,生产单位为:1～2号(金龙泉啤酒有限公司);3～4号(百威国际啤酒有限公司);5～6号(华润雪花啤酒有限公司);洗瓶添加剂(北京茂华科技有限公司);氢氧化钠(分析纯,天津市风船化学试剂科技有限公司);硫酸(分析纯,武汉市化学试剂厂);氯仿(分析纯,天津市东丽区天大化学试剂厂);直链烷基苯磺酸钠标准溶液(500 mg/L,环境保护部标准样品研究所);亚甲蓝(指示剂级,中国医药公司北京采购供应站);酚酞(分析纯,中国湘中地质实验研究所);乙酸铵(分析纯,天津市科密欧化学试剂开发中心);孔雀绿(分析纯,上海诚心化工有限公司);Na 2.1.2 仪器、试剂和仪器 Tu-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);DZKW-D-4电热恒温水浴锅(北京永光明医疗仪器厂);pH计(美国热电奥利龙公司);LC-10Avip液相色谱(日本岛津集团);超纯水器(Human公司);As3120超声波清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司);MICRO PES聚醚砜滤膜(德国MEMBRANA公司);Kd浓缩器(上海越磁电子科技有限公司);Waters2695液质联用仪(美国Waters公司);分液漏斗(天津玻璃仪器厂)。 2.2 实验方法 2.2.1 分光光度法 (1) ph值对络合反应的影响 分光光度法检测啤酒中残留十二烷基苯磺酸钠的含量要选择好进行络合反应的显色剂、显色时间以及最适pH值等。啤酒组分复杂,共存离子的干扰影响被测组分测定,选择分离杂质消除干扰方法比较适宜。 (2) 检测试剂空白值 ①工作曲线的绘制:取一组分液漏斗9个,分别加入100、99、97、95、93、91、89、87、85 mL水,然后分别移入0.00、1.00、3.00、5.00、7.00、9.00、11.00、13.00、15.00 mL直链烷基苯磺酸钠标准溶液,摇匀。处理标准系列,以测得的吸光度扣除试剂空白值(CHCl ②啤酒样品的前处理:参考GB/T 4928-2008《啤酒分析方法》 ③试份体积:根据预计的亚甲蓝表面活性物质的浓度选用试份体积,其中处理好的啤酒取用样品量为100 mL,洗瓶添加剂先稀释100倍后取用100 mL,加标回收测定时取用100 mL啤酒,分别加入1 mL的1、2、5 mg/L的直链烷基苯磺酸钠标准溶液混匀后测试。 ④将所取试份移至分液漏斗,以酚酞为指标剂,逐滴加入1 mol/L氢氧化钠溶液至水溶液呈桃红色,再滴加0.5 mol/L硫酸到桃红色刚好消失。 ⑤加入15 mL亚甲蓝溶液,摇匀后再移入10 mL氯仿,激烈振摇30 s,然后静置分层。 ⑥将氯仿层放入预先盛有50 mL洗涤液的第2个分液漏斗,激烈摇动30 s,静置分层。 ⑦放出氯仿层,在652 nm处进行吸光度测定。啤酒氯仿层有絮状悬浮物,主要是啤酒中有易溶于CHCl ⑧结果计算:在线性范围内设样品中LAS的含量为X(mg/L),则 2.2.2 高效液铬测定方法 (1) 分离度的最优化 高效液相色谱分析条件的建立就是确立检测器、色谱柱、流速及流动相组成等因素最优化的条件,实现被检测物质分离度的最优化,特别是优化流动相组成,以获得样品中各组分的最佳分离度和最短的分析时间。 (2) 线性范围内标准曲线的绘制和分析方法 样品前处理过程如下:①分别吸取10 mL的洗瓶添加剂、200 mL处理好的啤酒(含量低的取样500 mL或1000 mL)及10 mL LAS标准溶液(10μg/mL);