不同产地卤虫幼体对云龙石斑鱼幼苗生长和抗胁迫能力的影响.docx

? ? 不同产地卤虫幼体对云龙石斑鱼幼苗生长和抗胁迫能力的影响 ? ? 刘晓翠，邓洪刚，于学权，朱亚光，王鹏飞，隋丽英 (1. 天津科技大学海洋与环境学院，天津300457；2. 天津食品集团立达海水资源开发有限公司，天津300450；3. 西藏双湖县普若岗日生物科技有限公司，那曲853317) 石斑鱼是具有重要经济价值的海洋鱼类，近年来我国石斑鱼养殖产量逐年上升[1]，但由于石斑鱼苗种畸形率高、对环境的应激反应强烈、自相残杀严重、病害多，因此工厂化培育难度大[2-3]．云龙石斑鱼是云纹石斑鱼(♀ Epinehelus moara)与鞍带石斑鱼(♂Epinehelus lanceolatus)杂交而成的新品种，具有耐低温、肉质鲜美的特点，其生长快、抗病能力强，是市场认可度较高的优质杂交新品种．n-3高不饱和脂肪酸(n-3HUFA，C＞20)主要包括EPA和DHA，是细胞膜磷脂的重要成分，在细胞膜流动性、脂质性能、生殖发育、脂质代谢和免疫功能等方面发挥重要作用．但是，海洋鱼虾蟹类自身不能合成HUFA或合成能力有限，需要在饲料或饵料中补充[4-5]．研究[6]表明，饵料中一定水平的n-3HUFA(1.47%～1.70%)可显著提高杂交石斑鱼(♀Epinephelus fuscoguttatus×♂Epinephelus lanceolatu)幼鱼的生长速度、非特异性免疫力和抗病力，抑制炎症反应．饲料中一定水平的n-3HUFA(1.27%～1.42%)对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的增重率、饵料系数和蛋白质利用率都有显著促进作用，且石斑鱼肌肉中的n-3HUFA含量随饲料n-3HUFA水平的增加而增加[7]． 卤虫(Artemia)具有使用方便、适口性好和营养较为丰富等特点，是水产经济动物苗种重要的开口饵料[8]．全球商业化卤虫卵生产原料主要来源于中国、美国、俄罗斯和哈萨克斯坦等国的盐湖或日晒盐场．我国是卤虫卵资源采收、加工流通和使用的主要国家，卤虫卵资源主要分布在环渤海盐田以及青海、新疆、西藏等地的盐湖中．由于生物学和环境因子(如盐度、温度和饵料等)的差异，不同产地的卤虫卵径和卤虫幼体的大小、营养组成和含量有较大差别，甚至同一产地、不同时间采收的卤虫卵，其营养水平也有所不同[9-11]．西藏其香错盐湖卤虫个体大、颜色深红、富含EPA、孵化率高，孵化后幼体与卵、空壳分离好，近年来产量较大且稳定．中亚地区咸海卤虫卵市场价位具有竞争力，在国内苗种培育中广泛使用．咸海卤虫幼体EPA含量虽然较高，但与其香错卤虫幼体相比仍有一定的差距． 卤虫是非选择性滤食动物，可通过生物包裹的方式将水产苗种所需要的特殊成分(如HUFA、色素、免疫增强剂等)快速包裹于卤虫肠道，并通过摄食有效送达水产动物体内，因此缺乏水产动物必需脂肪酸的卤虫可以通过强化富含n-3HUFA的产品(如鱼油、裂殖壶藻等)实现其在海水育苗中的有效应用[12]． 本研究以西藏其香错卤虫幼体、裂殖壶藻强化的咸海卤虫幼体和不强化的咸海卤虫幼体投喂云龙石斑鱼幼苗，分析比较不同产地卤虫幼体和营养强化对石斑鱼幼苗生长、肌肉脂肪酸含量、抗氨氮胁迫和对弧菌攻毒的耐受力，旨在为不同产地卤虫幼体和营养强化在石斑鱼育苗中的有效应用提供参考． 1 材料与方法 1.1 卤虫幼体孵化与营养强化 本研究所用西藏其香错卤虫卵、中亚地区咸海卤虫卵分别由西藏双湖县普若岗日生物科技有限公司、天津食品集团立达海水资源开发有限公司提供．卤虫卵孵化条件：温度28℃，盐度20～30g/L，光照强度2000lx，连续充气．孵化24h后收集卤虫幼体，用相同盐度稀释卤水冲洗，备用． 咸海卤虫幼体收集后暂养6h，用裂殖壶藻(青岛越洋有限公司)进行营养强化．卤虫幼体强化条件：温度25℃，卤虫幼体密度150～200个/mL，裂殖壶藻剂量0.2g/L，强化时间6～12h． 1.2 石斑鱼养殖条件 石斑鱼苗种培育在天津食品集团立达海水资源开发有限公司进行．将石斑鱼幼苗分为3组，每组2个平行池，分别投喂其香错卤虫幼体、裂殖壶藻强化咸海卤虫幼体和未强化的咸海卤虫幼体，连续投喂30d．单位养殖水体40m3，每个养殖池中布卵300g.养殖水体盐度25g/L，温度25℃，溶解氧(DO)含量6～7mg/L．每天分别于09：00和15：00投喂卤虫幼体，每池每天的平均投喂量为32×106个卤虫幼体． 1.3 指标分析 1.3.1 卤虫幼体和石斑鱼肌肉脂肪酸组成及含量测定 将卤虫幼体在冷冻干燥机(德国Marin Christ公司)中干燥．精确称取冻干样品0.03g，加入1mg脂肪酸内标C20：2n-6(美国NU-CHEK PREP公司).分别以V(甲醇)﹕V(甲苯)＝3﹕2、V(氯乙酰)﹕V(甲醇)＝1﹕20的比例配制混合试剂，各