寄生虫病诊断、流行、防治与临床.ppt

病原学诊断 ?组织活检 ? 皮肤 ? 骨髓 ? 淋巴结 内脏利什曼病 锥虫病 弓形虫病 丝虫病 当前第30页\共有76页\编于星期五\8点 病原学诊断 ?组织活检 ? 皮肤 ? 骨髓 ? 淋巴结 ? 肌肉 旋毛虫病 囊虫病 裂头蚴病 肺吸虫病 当前第31页\共有76页\编于星期五\8点 病原学诊断 ?组织活检 ? 皮肤 ? 骨髓 ? 淋巴结 ? 肌肉 ? 直肠 溶组织内阿米巴 血吸虫卵 当前第32页\共有76页\编于星期五\8点 病原学诊断 ?组织活检 ? 皮肤 ? 骨髓 ? 淋巴结 ? 肌肉 ? 直肠 ? 肺 卫氏并殖吸虫成虫/虫卵 溶组织内阿米巴 卡氏肺孢子虫 当前第33页\共有76页\编于星期五\8点 ?痰液 病原学诊断 ?其他标本检查 卫氏并殖吸虫 蛔虫幼虫 钩虫幼虫 粪类圆线虫幼虫 卡氏肺孢子虫 溶组织内阿米巴滋养体 当前第34页\共有76页\编于星期五\8点 ?痰液 ?尿液 埃及血吸虫卵 肾膨结线虫卵 阴道毛滴虫 艾氏小杆线虫成虫 病原学诊断 ?其他标本检查 当前第35页\共有76页\编于星期五\8点 ?痰液 ?尿液 ?阴道分泌物 阴道毛滴虫 溶组织内阿米巴滋养体 病原学诊断 ?其他标本检查 当前第36页\共有76页\编于星期五\8点 ?痰液 ?尿液 ?阴道分泌物 ?十二指肠抽取液 蓝氏贾第鞭毛虫 华支睾吸虫卵 肝片形吸虫卵 布氏姜片虫卵 溶组织内阿米巴大滋养体 病原学诊断 ?其他标本检查 当前第37页\共有76页\编于星期五\8点 ?痰液 ?尿液 ?阴道分泌物 ?十二指肠抽取液 ?鞘膜积液 班氏微丝蚴 病原学诊断 ?其他标本检查 当前第38页\共有76页\编于星期五\8点 ?痰液 ?尿液 ?阴道分泌物 ?十二指肠抽取液 ?鞘膜积液 ?脑脊液 弓形虫 耐格里属阿米巴 广州圆线虫 病原学诊断 ?其他标本检查 当前第39页\共有76页\编于星期五\8点 病原学诊断 ?动物接种 在怀疑弓形虫感染时，可采取血液、骨髓、淋巴结、脑脊液沉淀的涂片染色镜检，但阳性机会不大，因此常将上述材料接种小白鼠以分离病原体。 当前第40页\共有76页\编于星期五\8点 1.皮内试验(IDT) 2.间接血凝试验(IHA) 3.免疫荧光法（IF） 4.免疫酶染色试验（IEST） 5.酶联免疫吸附试验（ELISA） 6.胶体金免疫测定技术（CGIA） 免疫学诊断 当前第41页\共有76页\编于星期五\8点 免疫学诊断 酶联免疫吸附试验（ELISA） 1) 抗原包被 2) 加样（一抗） 3) 洗涤 4) 加酶标抗体（二抗） 5) 洗涤 6) 加底物显色 7) 观察结果 当前第42页\共有76页\编于星期五\8点 免疫学诊断 胶体金免疫测定技术（CGIA） Dipstick + – C T 当前第43页\共有76页\编于星期五\8点 免疫学诊断 存在的问题 1. 不同寄生虫之间的交叉反应， 2. 难以区分现症感染与既往感染。 解决办法 1. 单一组分抗原， 2. 检测短程抗体。 当前第44页\共有76页\编于星期五\8点 分子生物学诊断 1.核酸分子杂交技术 * 虫体 DNA模板 标记的 DNA 探针 当前第45页\共有76页\编于星期五\8点 分子生物学诊断 2. PCR技术 当前第46页\共有76页\编于星期五\8点 分子生物学诊断 2. PCR技术 50?l反应体系 10×PCR缓冲液 5?l P1 0.2?mol/L P2 0.2?mol/L dNTP 200?mol/L Taq酶 2U 样本DNA 0.1?g H2O 补足50?l 当前第47页\共有76页\编于星期五\8点 分子生物学诊断 2. PCR技术 94℃ 4’ 94℃ 1’ 56℃ 1’ 72℃ 1’ 72℃ 8’ 35 Cycles 当前第48页\共有76页\编于星期五\8点 分子生物学诊断 2. PCR技术 PCR技术具有高度的敏感性，有严格的操作要求，若操作不当，很容易出现假阳性和假阴性，因此，在试验中应严格遵守操作规程，并同时设立阳性、阴性和空白对照。 当前第49页\共有76页\编于星期五\8点 （一