实验六家禽病毒性传染病诊断技术.pdf

实验六 家禽 性传染病诊断技术 血凝和血凝抑制试验 （Hemagglutination and Hemagglutination Inhibition Assay, HA and HI ） 家禽 性传染病诊断技术  临床症状和病理变化只能作为 的一 个指征，不能作为确诊的依据。 1. 病原检测 2. 抗体检测 3. 分子诊断 4. 鉴别诊断 分离鉴定 ➢ 的分离鉴定：是确诊的金标准。 样品 培养系统 分离方法 鉴定 病 粪 泄 鸡 原 传 匀 离 接 血 致 生 单 变 便 殖 胚 代 代 浆 心 胚 凝 病 物 抗 组 、 腔 细 细 或 取 试 性 学 分 织 肠 、 胞 胞 悬 上 验 试 特 群 内 气 浮 清 验 征 容 管 物 拭 子 ☺ 接种途径 1、绒毛 接种 （法氏囊、传喉） 2、尿囊腔接种 （ 、新城疫、传支） （鸭胚或鹅胚尿囊腔：鸭肝炎、鸭瘟、EDS-76） 3、卵黄囊接种 （法氏囊、EDS-76） 4、羊膜腔接种 正粘 和副粘 （流感、腮腺 炎等 ） ☺ 尿囊腔接种 主要用于正粘V和副粘V ，如流感V、新城疫V的分离 和增殖。 1 、 选 用 9-11 日龄 的 鸡 胚 ，画 出 气 室 和 胚 位 2、在气室接近胚体处用碘酊和 进行 3、用打孔器穿一小孔，将 注射器沿小孔插入0.5- 1.0cm ，注入0.1-0.2ml 接种物 4、用石蜡 ，并置孵卵箱中孵育， 每天翻卵并检卵一次，24h内 者 废弃。 绒毛 接种 主要用于痘V和疱疹V 的分离和增殖。 1）取10-12 日龄鸡胚，画出气室部， 2 ）在气室端的卵壳上开一1.5 ×1.5cm的口 3）用灭菌眼科镊子撕去一小片 内壳膜 4）滴入接种物 5）用胶布或透明胶纸封闭切口 ☺ 收毒 收毒前将鸡胚直立放置于4℃冰箱半小时以上，冻 死胚胎，防止 。 根据接种途径的不同，收获相应的材料 1、绒毛 接种 收获接种部位绒毛 2、尿囊腔接种 收获尿囊液 （5-8ml） 3、卵黄囊接种 收获卵黄囊或胚体 4、羊膜腔接种 收获羊水 （0.5-1ml） 一、实验目的 ➢血凝和血凝抑制试验的原理。 ➢实验操作步骤和结果判定。 ➢了解HA和HI实验的应用 （定性，定量）。 能凝集红细胞的禽的病原 ➢ ➢新城疫 ➢传染性支气管炎 （胰酶，磷脂酶C） ➢EDS76 ➢副鸡