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本发明涉及一种精准调控组装制备稳定酶蛋白环的方法,用醛酮还原酶作为模型蛋白,通过定点插入4‑叠氮基‑L‑苯丙氨酸,得到醛酮还原酶两点突变体;然后,双炔交联剂在微波的作用下,诱导细胞裂解液目标酶蛋白共价组装;通过控制细胞裂解上清液中的蛋白质浓度、突变位点以及交联剂的用量来调控酶蛋白组装体的形貌,得到环状交联酶蛋白。本发明利用蛋白质中非天然氨基酸分子与环辛双炔间的生物正交化学的特异性连接,仅用细胞裂解液就形成了酶蛋白的环状组装;本发明得到的酶蛋白环表现出强大的催化活性、热稳定性以及在模拟胃液和肠液中
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 113801872 A
(43)申请公布日 2021.12.17
(21)申请号 202111181436.1
(22)申请日 2021.10.11
(71)申请人 杭州师范大学
地址
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