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- 2023-06-13 发布于北京
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酸性染料比色法测定斜脉暗罗茎、叶和皮中总生物碱含量作者:刘冰晶 曾靖 李超 杜兵 曾发挥 曾雪亮来源:《江苏农业科学》2014年第01期
摘要:以小檗碱为对照品,在pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,以溴甲酚绿指示液为显色剂,利用分光光度法在628 nm测定斜脉暗罗中总生物碱含量,结果表明,小檗碱对照品在2.0~12.0 mg/L范围内浓度(C)与吸光度(D)呈线性关系,回归方程为D=0.008 2C+0.167 1,r=0.9991;斜脉暗罗茎、叶和皮中的总生物碱含量分别为 0.267 1%、1.473 7%和0.790 8%。分光光度比色法测定总生物碱含量操作简便,结果可靠,重复性好,可用于斜脉暗罗总生物碱含量的测定。
关键词:斜脉暗罗;总生物碱;紫外分光光度法;茎;叶;皮
中图分类号: R284.2文献标志码: A文章编号:1002-1302(2014)01-0263-02
收稿日期:2013-05-23
基金项目:江西省教育厅项目(编号:GJJ13678);赣南医学院项目(编号:YB201218)。
作者简介:刘冰晶(1988—),男,云南昆明人,硕士,助教,从事中药化学研究。E-mail:974141690@。斜脉暗罗(Polyalthia plagioneura)属番荔枝科(Annonaceae)暗罗属(Polyalthia genus),系我国特有种,分布于云南、广东、广西南部及海南[1],为海南优势种[2]。国内外学者从暗罗属20多种植物中得到了生物碱、萜类等多种类型化合物[3-4],从斜脉暗罗中分离得到生物碱类化合物marcanine A和少量其他化合物[5-7],但有关斜脉暗罗总生物碱含量的测定未见报道。本研究以小檗碱为对照品,在pH值为4.5的醋酸—醋酸钠缓冲溶液中,以溴甲酚绿为显色剂,在628 nm波长下,利用分光光度法测定斜脉暗罗总生物碱含量,为保护和合理利用药用植物资源斜脉暗罗提供科学依据。
1材料与方法
1.1仪器、试剂与材料
紫外可见分光光度计(尤尼柯UV-4802);98-C-數显控温电热套(天津泰斯特);索式提取器;电子天平;三氯甲烷(AR);溴甲酚绿(AR);小檗碱标准品(成都领航者生物);pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液;0.01 mol/L氢氧化钠溶液(用乙醇溶解)。
斜脉暗罗采自海南省昌江县霸王岭自然保护区,由海南师范大学生命科学学院钟琼芯教授鉴定为Polyalthia plagioneura,标本现藏于江西省脑血管药理重点实验室。
1.2 试验方法
参照刘冰晶等的方法[8-9]并进行改良。
1.2.1试验溶液配制用0.2 mol/L氢氧化钠滴加冰醋酸,调节pH值为4.5,即得醋酸—醋酸钠缓冲溶液;称取溴甲酚绿40 mg,加100 mL pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液溶解,过滤,即得0.04%溴甲酚绿溶液。
1.2.2标准曲线的制作称取干燥至恒重的小檗碱对照品2 mg,置于100 mL容量瓶中,用三氯甲烷定容至100 mL,摇匀即得20 mg/L标准溶液。取小檗碱对照品溶液,显色后进行可见-紫外全波长扫描,结果表明对照品溶液在628 nm处有最大吸收峰。经多次重复,峰形一致且空白对照无干扰,故选择628 nm作为样品测定的波长。取标准溶液1.2、2.4、36、4.8、6.0、7.2 mL分别置于 20 mL 容量瓶中,用三氯甲烷稀释至10 mL,加入pH值为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液 5.0 mL 和0.04%溴甲酚绿溶液 2.0 mL,剧烈振摇5 min,静置 30 min;取下层液5 mL,加入 0.01 mol/L 氢氧化钠—乙醇溶液1.0 mL,摇匀,于628 nm处测吸光度。以小檗碱含量为横坐标,吸光度为纵坐标制作标准曲线。
1.2.3空白溶液的制备取10 mL三氯甲烷溶液于20 mL容量瓶中,加入5.0 mL醋酸—醋酸钠缓冲液和0.04%溴甲酚绿溶液2 mL,···试读结束
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