《微生物学》第1章绪论.pptVIP

a）每个生物种都有特定的GC%范围，因此可以作为分类鉴定的指标。细菌的GC%范围为25-75%，变化范围最大。 b）GC%测定主要用于对表型特征难区分的细菌作出鉴定，从分子水平上判断物种的亲缘关系。 c）GC%的比较，主要用于分类鉴定中的否定.亲缘关系近的生物，它们应该具有相似的G+C含量，但具有相似G+C含量的生物，并不一定表明它们之间具有近的亲缘关系。 GC%使用注意事项： 同一个种内的不同菌株GC%含量差别应在4～5%以下； 同属不同种的差别应低于10～15%； GC%含量已经作为建立新的微生物分类单元的一项基本特征，它对于种、属甚至科的分类鉴定有重要意义。 若二个在形态及生理生化特性方面及其相似的菌株，如果其GC%含量的差别大于5%，则肯定不是同一个种，大于15%则肯定不是同一个属。 （2） 核酸的分子杂交 不同生物DNA碱基排列顺序的异同直接反映生物间亲缘关系的远近，碱基排列顺序差异越小，它们之间的亲缘关系就越近，反之亦然。 （3） rRNA基因序列同源性分析 rRNA分子的变易程度是一种很好的度量生物进化关系的分子钟。现在普遍应用的方法是高度自动化的rRNA基因序列分析。根据测序得到的碱基排列顺序，计算出不同微生物之间的碱基差异，并计算出以碱基差异百分数表示的遗传距离，根据遗传距离常采用邻接法进行聚类分析，得到系统发育树状图。 2. 微生物全基因组序列测定 第一个古菌：詹氏甲烷杆菌 第一个细菌：流感嗜血杆菌 第一个真菌：酿酒酵母 3. 细胞化学组分分析 细胞壁组成成分分析 脂肪酸组成及代谢产物分析 蛋白质序列分析和电泳 * 法国，化学家，路易斯 · 巴斯德 （Louis Pasteur，1822—1895） 微生物学的奠基人 巴斯德反驳自然发生说的三个实验 空 气 乙醇、醚混合物 棉纤维 沉淀物 检测 第一个实验 第二个实验 加热 营养液 密封 放置 细菌检测 无细菌检出 自然发生说质疑： 无机物自然变为生命有机体必须提供新鲜的空气 第三个实验 （2）科赫与疾病的病菌说 最早人们认为疾病是由诸如超自然力、被称为瘴毒的毒气以及四种体液（血液、粘痰、黄胆汁、黑胆汁）之间的失调而引起的。 Agostino Bassi（1773~1856）在1835年证明蚕病是由真菌感染引起的，首先提出微生物可引起疾病。 1845年，M. J. Berkeley证明爱尔兰马铃薯枯萎病（Potato Blight of Ireland）是由真菌引起的。 之后，巴斯德提出“蚕的微粒子病”是由原生动物寄生虫引起的。 Lister受巴斯德关于微生物在发酵和腐败问题中研究的启发，提出了外科消毒术，消毒所使用的石炭酸可以杀死细菌，同样也可以阻止伤口感染，这一观点为微生物在疾病中的作用提供了间接的证据。 （2）科赫与疾病的病菌说 德国，乡村医生，科赫 （Robert Koch，1843~1910） 细菌学奠基人 直接关系的证明来自于德国医生柯赫对炭疽菌的研究（1876年） 科赫法则 1、病原微生物存在于患病动物中,而健康动物中没有； 2、该微生物可在离开动物体外纯培养生长； 3、当培养物接种易感动物时产生特定的疾病症状； 4、该病原微生物可从患病的实验动物中重新分离到,且在实验室能够再次培养,最终具有与原始菌株相同的性状。 柯赫其他主要贡献： 建立了纯培养技术 （凝固剂和petri dish） 对结核杆菌的分离和观察，首创了抗酸菌染色的Ziehl-Nielsen染色法（抗酸染色法） 结核 组织 结核杆菌 发现和分离了引起霍乱的微生物——霍乱弧菌，发现了在控制霍乱传播中水过滤的重要性，发表了第一张细菌的显微镜照片。 2.4 发展时期（生物化学水平） 德国人E.Buchner （1897年）用无细胞的酵母菌裂解液中的混合酶对葡萄糖进行了酒精发酵： 酵母细胞 石英砂研磨 过滤 滤液 葡萄糖 酵母细胞 酒精、CO2 巴斯德提出发酵是由微生物引起；他还发现了厌氧微生物。 Martinus Beijerinck（1851-1931）对微生物领域的最大贡献是提出了富集培养概念。用富集培养技术Beijerinck从土壤和水中分离得到许多纯种微生物，包括好气的固氮菌、硫化细菌、固氮根瘤菌、乳酸菌、绿藻和许多其他微生物。在研究烟草花叶病时，Beijerinck指出感染物（一种病毒）不是细菌，而是寄生到植物