实验室常用染色液配方.pdf

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实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A 液:美蓝(Methylene blue) 0。3 克95%酒精 毫升 B 液:氢氧化钾(KOH) 0。01 克蒸馏水 100 毫升分别配制A 液 B 液,然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A 液:碱性复红(Basic fuchsin ) 0.3 克95%酒精 10.O 毫升 B 液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水 95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中,配成A 液。将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B 液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker 改订) A 液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精 25.0 毫升 B 液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水 100 毫升 将结晶紫研细后,加入 95%酒精,使之溶解,配成A 液。将草酸铵溶于蒸馏水,配成 B 液.两 液混合即成. 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用) 碘 1。0 克碘化钾 2.0 克蒸馏水 300 毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用) 番红O (Safranin O) 2.0 克 蒸馏水 100 毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用) 孔雀绿(Malachite green) 5.0 克蒸馏水 100 毫升先将孔雀绿研细,加少许 95%酒精溶解, 再加蒸馏水。 7、Dorner 黑素液(英膜染色用) 黑素(Nigrosin) 10.0 克蒸馏水 100 毫升福尔马林(40%甲醛) 0。5 毫升将黑素在蒸馏水中煮 沸5 分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2。0 克蒸馏水 100 毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用) 结晶紫染色液(同3) 5.0 毫升蒸馏水 95。0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存) 石炭酸 10.0 克 甘油 20。0 毫升乳酸(比重l。21) 10。0 毫升 棉蓝 0。02 克蒸馏水 10。 0 毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。 11 动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色:二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min,依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L 及700 mL/L 的酒精各5 min,蒸馏水洗;入苏木精染液 10 min,盐酸酒精分色4 s,自来水洗10 min;依次入700 mL/L, 800 mL/L 及900 mL/L 酒精各5 min,入伊红染 液染色 10 min;入950 mL/L 及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明,中性树脂封片。 一、常用染色液的配制 ⒈碘—碘化钾(I2—KI)溶液 能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂. 配方:碘化钾2g ; 蒸馏水300ml ; 碘 1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻 璃瓶内。用时可将其稀释2-10 倍,这样染色不致过深,效果更佳. ⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ) 能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。 配方:(1)苏丹III 或苏丹Ⅳ干粉0。1g ; 95%酒精10ml ; 过滤后再加入 10ml 甘油 (2)先将0。1g 苏丹III 或IV 溶解在50ml 丙酮中,再加入70%酒精50ml。 (3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1%醋酸洋红(aceto carmine) 酸性染料, 适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。 配方:洋红 1g ; 45%醋酸100ml 煮沸2 左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4 %铁明矾溶液1~2 滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用。 ⒋改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine) 核染色剂. 配制步骤: 先配成三种原液,再配成染色液。 原液A:3g 碱性品红溶于 100ml 70%酒精中。 原液B:取原液A10ml 加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。 原液C:取原液B 55ml,加入6ml 冰醋酸和6ml 福尔马林(38%的甲醛)。 (原液A 和原液C 可长期保存,原液 B 限两周内使用) 染色液:取C 液 10~20ml,加45 %冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1

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